കൊതുകുകൾക്കെതിരായ പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദ ലാർവിസൈഡായി കാബേജ് വിത്ത് പൊടിയുടെയും അതിന്റെ സംയുക്തങ്ങളുടെയും ജൈവിക പ്രവർത്തനം.

ഫലപ്രദമായികൊതുകുകളെ നിയന്ത്രിക്കുകഅവ വഹിക്കുന്ന രോഗങ്ങളുടെ എണ്ണം കുറയ്ക്കുന്നതിനും, രാസ കീടനാശിനികൾക്ക് പകരം തന്ത്രപരവും, സുസ്ഥിരവും, പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദപരവുമായ ബദലുകൾ ആവശ്യമാണ്. ഈജിപ്ഷ്യൻ ഈഡിസിന്റെ നിയന്ത്രണത്തിൽ ഉപയോഗിക്കുന്നതിനായി ജൈവശാസ്ത്രപരമായി നിഷ്ക്രിയമായ ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ എൻസൈമാറ്റിക് ജലവിശ്ലേഷണം വഴി ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന സസ്യങ്ങളിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകളുടെ ഉറവിടമായി ചില ബ്രാസിക്കേസി (ബ്രാസിക്ക കുടുംബം) യിൽ നിന്നുള്ള വിത്ത് ഭക്ഷണം ഞങ്ങൾ വിലയിരുത്തി (L., 1762). അഞ്ച് കൊഴുപ്പില്ലാത്ത വിത്ത് ഭക്ഷണം (ബ്രാസിക്ക ജുൻസിയ (എൽ) സെർൺ., 1859, ലെപിഡിയം സാറ്റിവം എൽ., 1753, സിനാപിസ് ആൽബ എൽ., 1753, ത്ലാസ്പി ആർവെൻസ് എൽ., 1753, ത്ലാസ്പി ആർവെൻസ് - മൂന്ന് പ്രധാന തരം താപ നിഷ്ക്രിയത്വവും എൻസൈമാറ്റിക് ഡീഗ്രഡേഷനും. 24 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷറിൽ ആലൈൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ്, ബെൻസിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ്, 4-ഹൈഡ്രോക്സിബെൻസിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് എന്നിവയുടെ വിഷാംശം (LC50) നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള രാസ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ = 0.04 ഗ്രാം/120 മില്ലി dH2O). കടുക്, വെളുത്ത കടുക്, കുതിരവാൽ എന്നിവയ്ക്കുള്ള LC50 മൂല്യങ്ങൾ. അല്ലൈൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് (LC50 = 19.35 ppm) ഉം 4 ഉം താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ വിത്ത് ഭക്ഷണം യഥാക്രമം 0.05, 0.08, 0.05 ആയിരുന്നു. -ഹൈഡ്രോക്സിബെൻസൈലിസോത്തിയോസയനേറ്റ് (LC50 = 55.41 ppm) ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം 24 മണിക്കൂർ കഴിഞ്ഞ് ലാർവകൾക്ക് യഥാക്രമം 0.1 ഗ്രാം/120 മില്ലി dH2O യേക്കാൾ കൂടുതൽ വിഷാംശം നൽകി. ഈ ഫലങ്ങൾ ആൽഫാൽഫ വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ ഉൽപാദനവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. ബെൻസിൽ എസ്റ്ററുകളുടെ ഉയർന്ന കാര്യക്ഷമത കണക്കാക്കിയ LC50 മൂല്യങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. വിത്ത് ഭക്ഷണം ഉപയോഗിക്കുന്നത് കൊതുക് നിയന്ത്രണത്തിന് ഫലപ്രദമായ ഒരു രീതി നൽകും. കൊതുക് ലാർവകൾക്കെതിരെ ക്രൂസിഫറസ് വിത്ത് പൊടിയുടെയും അതിന്റെ പ്രധാന രാസ ഘടകങ്ങളുടെയും ഫലപ്രാപ്തി, ക്രൂസിഫറസ് വിത്ത് പൊടിയിലെ സ്വാഭാവിക സംയുക്തങ്ങൾ കൊതുക് നിയന്ത്രണത്തിന് ഒരു വാഗ്ദാനമായ പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദ ലാർവിസൈഡായി എങ്ങനെ പ്രവർത്തിക്കുമെന്ന് കാണിക്കുന്നു.
ഈഡിസ് കൊതുകുകൾ മൂലമുണ്ടാകുന്ന രോഗാണുക്കൾ വഴി പകരുന്ന രോഗങ്ങൾ ഒരു പ്രധാന ആഗോള പൊതുജനാരോഗ്യ പ്രശ്നമായി തുടരുന്നു. കൊതുകുകൾ വഴി പകരുന്ന രോഗങ്ങൾ ഭൂമിശാസ്ത്രപരമായി 1,2,3 പടരുകയും വീണ്ടും പ്രത്യക്ഷപ്പെടുകയും ചെയ്യുന്നു, ഇത് ഗുരുതരമായ രോഗങ്ങളുടെ വ്യാപനത്തിലേക്ക് നയിക്കുന്നു4,5,6,7. മനുഷ്യരിലും മൃഗങ്ങളിലും (ഉദാഹരണത്തിന്, ചിക്കുൻഗുനിയ, ഡെങ്കി, റിഫ്റ്റ് വാലി പനി, മഞ്ഞപ്പനി, സിക്ക വൈറസ്) രോഗങ്ങളുടെ വ്യാപനം അഭൂതപൂർവമാണ്. ഡെങ്കിപ്പനി മാത്രം ഉഷ്ണമേഖലാ പ്രദേശങ്ങളിൽ ഏകദേശം 3.6 ബില്യൺ ആളുകളെ അണുബാധയുടെ അപകടസാധ്യതയിലേക്ക് നയിക്കുന്നു, പ്രതിവർഷം ഏകദേശം 390 ദശലക്ഷം അണുബാധകൾ സംഭവിക്കുന്നു, ഇത് പ്രതിവർഷം 6,100–24,300 മരണങ്ങൾക്ക് കാരണമാകുന്നു8. രോഗബാധിതരായ സ്ത്രീകൾക്ക് ജനിക്കുന്ന കുട്ടികളിൽ മസ്തിഷ്ക ക്ഷതം ഉണ്ടാക്കുന്നതിനാൽ തെക്കേ അമേരിക്കയിൽ സിക്ക വൈറസ് വീണ്ടും പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നതും പൊട്ടിപ്പുറപ്പെടുന്നതും ലോകമെമ്പാടും ശ്രദ്ധ ആകർഷിച്ചു2. ഈഡിസ് കൊതുകുകളുടെ ഭൂമിശാസ്ത്രപരമായ പരിധി വികസിക്കുന്നത് തുടരുമെന്നും 2050 ആകുമ്പോഴേക്കും ലോകജനസംഖ്യയുടെ പകുതിയും കൊതുകുകൾ വഴി പകരുന്ന ആർബോവൈറസുകൾ വഴി അണുബാധയ്ക്ക് ഇരയാകുമെന്നും ക്രെമർ തുടങ്ങിയവർ പ്രവചിക്കുന്നു.
ഡെങ്കിപ്പനി, മഞ്ഞപ്പനി എന്നിവയ്‌ക്കെതിരെ അടുത്തിടെ വികസിപ്പിച്ചെടുത്ത വാക്സിനുകൾ ഒഴികെ, മിക്ക കൊതുക് വഴി പകരുന്ന രോഗങ്ങൾക്കുമുള്ള വാക്സിനുകൾ ഇതുവരെ വികസിപ്പിച്ചിട്ടില്ല9,10,11. വാക്സിനുകൾ ഇപ്പോഴും പരിമിതമായ അളവിൽ ലഭ്യമാണ്, ക്ലിനിക്കൽ പരീക്ഷണങ്ങളിൽ മാത്രമാണ് ഇവ ഉപയോഗിക്കുന്നത്. കൊതുക് വഴി പകരുന്ന രോഗങ്ങളുടെ വ്യാപനം നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു പ്രധാന തന്ത്രമാണ് സിന്തറ്റിക് കീടനാശിനികൾ ഉപയോഗിച്ചുള്ള കൊതുക് വെക്റ്ററുകളുടെ നിയന്ത്രണം12,13. കൊതുകുകളെ കൊല്ലുന്നതിൽ സിന്തറ്റിക് കീടനാശിനികൾ ഫലപ്രദമാണെങ്കിലും, സിന്തറ്റിക് കീടനാശിനികളുടെ തുടർച്ചയായ ഉപയോഗം ലക്ഷ്യമില്ലാത്ത ജീവികളെ പ്രതികൂലമായി ബാധിക്കുകയും പരിസ്ഥിതിയെ മലിനമാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു14,15,16. രാസ കീടനാശിനികളോടുള്ള കൊതുകിന്റെ പ്രതിരോധം വർദ്ധിക്കുന്ന പ്രവണത അതിലും ഭയാനകമാണ്17,18,19. കീടനാശിനികളുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ഈ പ്രശ്നങ്ങൾ രോഗ വെക്റ്ററുകളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിന് ഫലപ്രദവും പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദവുമായ ബദലുകൾക്കായുള്ള തിരയലിനെ ത്വരിതപ്പെടുത്തിയിട്ടുണ്ട്.
കീട നിയന്ത്രണത്തിനായി ഫൈറ്റോകീടനാശിനികളുടെ ഉറവിടങ്ങളായി വിവിധ സസ്യങ്ങൾ വികസിപ്പിച്ചെടുത്തിട്ടുണ്ട്20,21. സസ്യ പദാർത്ഥങ്ങൾ ജൈവ വിസർജ്ജ്യമായതിനാൽ പൊതുവെ പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദമാണ്, കാരണം അവ സസ്തനികൾ, മത്സ്യം, ഉഭയജീവികൾ തുടങ്ങിയ ലക്ഷ്യമില്ലാത്ത ജീവികൾക്ക് കുറഞ്ഞതോ നിസ്സാരമോ ആയ വിഷാംശം ഉണ്ട്20,22. കൊതുകുകളുടെ വ്യത്യസ്ത ജീവിത ഘട്ടങ്ങളെ ഫലപ്രദമായി നിയന്ത്രിക്കുന്നതിന് വ്യത്യസ്ത പ്രവർത്തന സംവിധാനങ്ങളുള്ള വൈവിധ്യമാർന്ന ജൈവശാസ്ത്രപരമായി സജീവമായ സംയുക്തങ്ങൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കാൻ സസ്യ തയ്യാറെടുപ്പുകൾ അറിയപ്പെടുന്നു23,24,25,26. അവശ്യ എണ്ണകളും മറ്റ് സജീവ സസ്യ ഘടകങ്ങളും പോലുള്ള സസ്യങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള സംയുക്തങ്ങൾ ശ്രദ്ധ നേടുകയും കൊതുക് വെക്റ്ററുകളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനുള്ള നൂതന ഉപകരണങ്ങൾക്ക് വഴിയൊരുക്കുകയും ചെയ്തു. അവശ്യ എണ്ണകൾ, മോണോടെർപീനുകൾ, സെസ്ക്വിറ്റെർപീനുകൾ എന്നിവ വികർഷണങ്ങളായും, ഭക്ഷണ പ്രതിരോധകങ്ങളായും, ഓവിസൈഡുകളായും പ്രവർത്തിക്കുന്നു27,28,29,30,31,32,33. പല സസ്യ എണ്ണകളും കൊതുക് ലാർവകളുടെയും പ്യൂപ്പകളുടെയും മുതിർന്നവരുടെയും മരണത്തിന് കാരണമാകുന്നു34,35,36, ഇത് പ്രാണികളുടെ നാഡീ, ശ്വസന, എൻഡോക്രൈൻ, മറ്റ് പ്രധാന സംവിധാനങ്ങളെ ബാധിക്കുന്നു37.
കടുക് ചെടികളുടെയും അവയുടെ വിത്തുകളുടെയും ജൈവ-സജീവ സംയുക്തങ്ങളുടെ ഉറവിടമായി ഉപയോഗിക്കാനുള്ള സാധ്യതയെക്കുറിച്ച് സമീപകാല പഠനങ്ങൾ ഉൾക്കാഴ്ച നൽകിയിട്ടുണ്ട്. കടുക് വിത്ത് പൊടി ഒരു ജൈവ-സ്പ്രേരക 38,39,40,41 ആയി പരീക്ഷിച്ചു, കളകളെ അടിച്ചമർത്തുന്നതിനും മണ്ണിലൂടെ പകരുന്ന സസ്യ രോഗകാരികളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനും മണ്ണ് ഭേദഗതിയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു42,43,44,45, മണ്ണിൽ പരത്തുന്ന സസ്യ രോഗകാരികളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനും45,46,47,48,49,50, സസ്യ പോഷണം. നിമാവിരകൾ 41,51, 52, 53, 54, കീടങ്ങൾ 55, 56, 57, 58, 59, 60. ഈ വിത്ത് പൊടികളുടെ കുമിൾനാശിനി പ്രവർത്തനം ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ്സ് എന്നറിയപ്പെടുന്ന സസ്യ സംരക്ഷണ സംയുക്തങ്ങളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു38,42,60. സസ്യങ്ങളിൽ, ഈ സംരക്ഷണ സംയുക്തങ്ങൾ സസ്യകോശങ്ങളിൽ നോൺ-ബയോആക്ടീവ് ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ രൂപത്തിൽ സൂക്ഷിക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, പ്രാണികളുടെ തീറ്റ മൂലമോ രോഗകാരി അണുബാധ മൂലമോ സസ്യങ്ങൾക്ക് കേടുപാടുകൾ സംഭവിക്കുമ്പോൾ, ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളെ മൈറോസിനേസ് ഉപയോഗിച്ച് ജലവിശ്ലേഷണം ചെയ്ത് ബയോ ആക്റ്റീവ് ഐസോതിയോസയനേറ്റുകളാക്കി മാറ്റുന്നു55,61. ഐസോതിയോസയനേറ്റുകൾക്ക് വിശാലമായ സ്പെക്ട്രം ആന്റിമൈക്രോബയൽ, കീടനാശിനി പ്രവർത്തനങ്ങൾ ഉള്ളതായി അറിയപ്പെടുന്ന അസ്ഥിരമായ സംയുക്തങ്ങളുണ്ട്, കൂടാതെ അവയുടെ ഘടന, ജൈവിക പ്രവർത്തനം, ഉള്ളടക്കം എന്നിവ ബ്രാസിക്കേസി സ്പീഷീസുകളിൽ വ്യാപകമായി വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു42,59,62,63.
കടുക് വിത്ത് പൊടിയിൽ നിന്ന് ലഭിക്കുന്ന ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകൾക്ക് കീടനാശിനി പ്രവർത്തനം ഉണ്ടെന്ന് അറിയപ്പെടുന്നുണ്ടെങ്കിലും, വൈദ്യശാസ്ത്രപരമായി പ്രധാനപ്പെട്ട ആർത്രോപോഡ് വെക്ടറുകൾക്കെതിരായ ജൈവിക പ്രവർത്തനത്തെക്കുറിച്ചുള്ള ഡാറ്റ ലഭ്യമല്ല. ഈഡിസ് കൊതുകുകൾക്കെതിരായ നാല് കൊഴുപ്പ് നീക്കം ചെയ്ത വിത്ത് പൊടികളുടെ ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം ഞങ്ങളുടെ പഠനം പരിശോധിച്ചു. ഈഡിസ് ഈജിപ്തിയുടെ ലാർവകൾ. കൊതുക് നിയന്ത്രണത്തിനായി പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദ ജൈവകീടനാശിനികളായി അവയുടെ സാധ്യതകൾ വിലയിരുത്തുക എന്നതായിരുന്നു പഠനത്തിന്റെ ലക്ഷ്യം. വിത്ത് പൊടിയിലെ മൂന്ന് പ്രധാന രാസ ഘടകങ്ങളായ അല്ലൈൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് (AITC), ബെൻസിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് (BITC), 4-ഹൈഡ്രോക്സിബെൻസിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് (4-HBITC) എന്നിവയും കൊതുക് ലാർവകളിൽ ഈ രാസ ഘടകങ്ങളുടെ ജൈവിക പ്രവർത്തനം പരിശോധിക്കുന്നതിനായി പരീക്ഷിച്ചു. കൊതുക് ലാർവകൾക്കെതിരായ നാല് കാബേജ് വിത്ത് പൊടികളുടെയും അവയുടെ പ്രധാന രാസ ഘടകങ്ങളുടെയും ഫലപ്രാപ്തി വിലയിരുത്തുന്ന ആദ്യ റിപ്പോർട്ടാണിത്.
ഈഡിസ് ഈജിപ്തി (റോക്ക്ഫെല്ലർ സ്ട്രെയിൻ) യുടെ ലബോറട്ടറി കോളനികളെ 26°C, 70% ആപേക്ഷിക ആർദ്രത (RH), 10:14 മണിക്കൂർ (L:D ഫോട്ടോപീരിയഡ്) എന്നിവയിൽ നിലനിർത്തി. ഇണചേർന്ന പെൺമൃഗങ്ങളെ പ്ലാസ്റ്റിക് കൂടുകളിൽ (ഉയരം 11 സെ.മീ, വ്യാസം 9.5 സെ.മീ) പാർപ്പിക്കുകയും സിട്രേറ്റഡ് ബോവിൻ രക്തം (ഹെമോസ്റ്റാറ്റ് ലബോറട്ടറീസ് ഇൻ‌കോർപ്പറേറ്റഡ്, ഡിക്സൺ, സി‌എ, യുഎസ്‌എ) ഉപയോഗിച്ച് കുപ്പി തീറ്റ സംവിധാനം വഴി ഭക്ഷണം നൽകുകയും ചെയ്തു. 37°C താപനില നിയന്ത്രണമുള്ള ഒരു രക്തചംക്രമണ വാട്ടർ ബാത്ത് ട്യൂബുമായി (HAAKE S7, തെർമോ-സയന്റിഫിക്, വാൾത്താം, എം‌എ, യുഎസ്‌എ) ബന്ധിപ്പിച്ചിരിക്കുന്ന ഒരു മെംബ്രൻ മൾട്ടി-ഗ്ലാസ് ഫീഡർ (കെംഗ്ലാസ്, ലൈഫ് സയൻസസ് എൽ‌എൽ‌സി, വൈൻ‌ലാൻഡ്, എൻ‌ജെ, യുഎസ്‌എ) ഉപയോഗിച്ച് പതിവുപോലെ രക്തദാനം നടത്തി. ഓരോ ഗ്ലാസ് ഫീഡ് ചേമ്പറിന്റെയും അടിയിൽ (വിസ്തീർണ്ണം 154 mm2) പാരാഫിലിം M ന്റെ ഒരു ഫിലിം നീട്ടുക. തുടർന്ന് ഓരോ ഫീഡറും ഇണചേരുന്ന പെൺമൃഗത്തെ ഉൾക്കൊള്ളുന്ന കൂട്ടിനെ മൂടുന്ന മുകളിലെ ഗ്രിഡിൽ സ്ഥാപിച്ചു. ഒരു ഗ്ലാസ് ഫീഡർ ഫണലിൽ പാസ്ചർ പൈപ്പറ്റ് (ഫിഷർബ്രാൻഡ്, ഫിഷർ സയന്റിഫിക്, വാൾത്താം, എംഎ, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ച് ഏകദേശം 350–400 μl പശുവിന്റെ രക്തം ചേർത്തു, മുതിർന്ന പുഴുക്കളെ കുറഞ്ഞത് ഒരു മണിക്കൂറെങ്കിലും വറ്റിക്കാൻ അനുവദിച്ചു. ഗർഭിണികളായ സ്ത്രീകൾക്ക് പിന്നീട് 10% സുക്രോസ് ലായനി നൽകി, വ്യക്തിഗത അൾട്രാ-ക്ലിയർ സൂഫിൽ കപ്പുകളിൽ (1.25 fl oz വലുപ്പം, ഡാർട്ട് കണ്ടെയ്നർ കോർപ്പ്, മേസൺ, MI, യുഎസ്എ) നിരത്തിയ നനഞ്ഞ ഫിൽട്ടർ പേപ്പറിൽ മുട്ടയിടാൻ അനുവദിച്ചു. വെള്ളമുള്ള കൂട്ടിൽ. മുട്ടകൾ അടങ്ങിയ ഫിൽട്ടർ പേപ്പർ ഒരു സീൽ ചെയ്ത ബാഗിൽ (SC Johnsons, Racine, WI) വയ്ക്കുകയും 26°C യിൽ സൂക്ഷിക്കുകയും ചെയ്തു. മുട്ടകൾ വിരിഞ്ഞു, ഏകദേശം 200–250 ലാർവകളെ 2:1:1 എന്ന അനുപാതത്തിൽ മുയൽ ചൗ (ZuPreem, Premium Natural Products, Inc., Mission, KS, USA), കരൾ പൊടി (MP Biomedicals, LLC, Solon, OH, USA), ഫിഷ് ഫില്ലറ്റ് (TetraMin, Tetra GMPH, Meer, Germany) എന്നിവയുടെ മിശ്രിതം അടങ്ങിയ പ്ലാസ്റ്റിക് ട്രേകളിൽ വളർത്തി. ഞങ്ങളുടെ ബയോഅസെകളിൽ മൂന്നാം ഘട്ടത്തിലെ അവസാന ലാർവകളെ ഉപയോഗിച്ചു.
ഈ പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിച്ച സസ്യ വിത്ത് വസ്തുക്കൾ ഇനിപ്പറയുന്ന വാണിജ്യ, സർക്കാർ സ്രോതസ്സുകളിൽ നിന്നാണ് ലഭിച്ചത്: യുഎസ്എയിലെ വാഷിംഗ്ടൺ സ്റ്റേറ്റിലുള്ള പസഫിക് നോർത്ത്‌വെസ്റ്റ് ഫാർമേഴ്‌സ് കോപ്പറേറ്റീവ് സ്ഥാപനത്തിൽ നിന്നുള്ള ബ്രാസിക്ക ജുൻസിയ (തവിട്ട് കടുക്-പസഫിക് ഗോൾഡ്), ബ്രാസിക്ക ജുൻസിയ (വെള്ള കടുക്-ഇഡ ഗോൾഡ്); യുഎസ്എയിലെ പിയോറിയയിലെ കെല്ലി സീഡ് ആൻഡ് ഹാർഡ്‌വെയർ കമ്പനിയിൽ നിന്നുള്ള (ഗാർഡൻ ക്രെസ്), യുഎസ്എയിലെ പിയോറിയയിലെ യുഎസ്ഡിഎ-എആർഎസിൽ നിന്നുള്ള ത്ലാസ്പി ആർവെൻസ് (ഫീൽഡ് പെന്നിക്രെസ്-എലിസബത്ത്); പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിച്ച വിത്തുകളൊന്നും കീടനാശിനികൾ ഉപയോഗിച്ചിട്ടില്ല. എല്ലാ വിത്ത് വസ്തുക്കളും പ്രാദേശികവും ദേശീയവുമായ നിയന്ത്രണങ്ങൾക്കനുസൃതമായും പ്രസക്തമായ എല്ലാ പ്രാദേശിക സംസ്ഥാന, ദേശീയ നിയന്ത്രണങ്ങൾക്കും അനുസൃതമായും ഈ പഠനത്തിൽ സംസ്കരിച്ച് ഉപയോഗിച്ചു. ഈ പഠനം ട്രാൻസ്ജെനിക് സസ്യ ഇനങ്ങൾ പരിശോധിച്ചില്ല.
ബ്രാസിക്ക ജുൻസിയ (PG), അൽഫാൽഫ (Ls), വെളുത്ത കടുക് (IG), Thlaspi arvense (DFP) വിത്തുകൾ Retsch ZM200 അൾട്രാസെൻട്രിഫ്യൂഗൽ മിൽ (Retsch, Haan, Germany) ഉപയോഗിച്ച് 0.75 mm മെഷും സ്റ്റെയിൻലെസ് സ്റ്റീൽ റോട്ടറും, 12 പല്ലുകളും, 10,000 rpm ഉം (പട്ടിക 1) ഘടിപ്പിച്ച ഒരു നേർത്ത പൊടിയാക്കി. പൊടിച്ച വിത്ത് പൊടി ഒരു പേപ്പർ തിംബിളിലേക്ക് മാറ്റി 24 മണിക്കൂർ സോക്സ്ലെറ്റ് ഉപകരണത്തിൽ ഹെക്സെയ്ൻ ഉപയോഗിച്ച് ഡീഫാറ്റ് ചെയ്തു. കൊഴുപ്പ് കുറഞ്ഞ ഫീൽഡ് കടുകിന്റെ ഒരു ഉപസാമ്പിൾ 100 °C താപനിലയിൽ 1 മണിക്കൂർ ഹീറ്റ് ട്രീറ്റ് ചെയ്തു, മൈറോസിനേസ് ഡീനേച്ചർ ചെയ്യാനും ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ ജലവിശ്ലേഷണം തടയാനും ജൈവശാസ്ത്രപരമായി സജീവമായ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകൾ രൂപപ്പെടുത്താനും ഉപയോഗിച്ചു. മൈറോസിനേസ് ഡീനാച്ചർ ചെയ്തുകൊണ്ട് ഹീറ്റ്-ട്രീറ്റ് ചെയ്ത ഹോർസെറ്റൈൽ വിത്ത് പൊടി (DFP-HT) നെഗറ്റീവ് നിയന്ത്രണമായി ഉപയോഗിച്ചു.
മുമ്പ് പ്രസിദ്ധീകരിച്ച ഒരു പ്രോട്ടോക്കോൾ 64 അനുസരിച്ച്, ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (HPLC) ഉപയോഗിച്ച് കൊഴുപ്പ് നീക്കം ചെയ്ത വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റ് ഉള്ളടക്കം ട്രിപ്പിളിക്കേറ്റായി നിർണ്ണയിച്ചു. ചുരുക്കത്തിൽ, 250 മില്ലിഗ്രാം കൊഴുപ്പ് നീക്കം ചെയ്ത വിത്ത് പൊടിയുടെ സാമ്പിളിൽ 3 മില്ലി മെഥനോൾ ചേർത്തു. ഓരോ സാമ്പിളും 30 മിനിറ്റ് വാട്ടർ ബാത്തിൽ സോണിക്കേറ്റ് ചെയ്യുകയും 23°C താപനിലയിൽ 16 മണിക്കൂർ ഇരുട്ടിൽ വയ്ക്കുകയും ചെയ്തു. തുടർന്ന് 1 മില്ലി ജൈവ പാളിയുടെ ഒരു ഭാഗം 0.45 μm ഫിൽട്ടർ വഴി ഒരു ഓട്ടോസാംപ്ലറിലേക്ക് ഫിൽട്ടർ ചെയ്തു. ഒരു ഷിമാഡ്‌സു HPLC സിസ്റ്റത്തിൽ (രണ്ട് LC 20AD പമ്പുകൾ; SIL 20A ഓട്ടോസാംപ്ലർ; DGU 20As ഡീഗാസർ; 237 nm-ൽ നിരീക്ഷിക്കുന്നതിനുള്ള SPD-20A UV-VIS ഡിറ്റക്ടർ; CBM-20A കമ്മ്യൂണിക്കേഷൻ ബസ് മൊഡ്യൂൾ) പ്രവർത്തിക്കുമ്പോൾ, വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റ് ഉള്ളടക്കം ട്രിപ്പിളിക്കേറ്റായി നിർണ്ണയിച്ചു. ഷിമാഡ്‌സു എൽസി സൊല്യൂഷൻ സോഫ്റ്റ്‌വെയർ പതിപ്പ് 1.25 (ഷിമാഡ്‌സു കോർപ്പറേഷൻ, കൊളംബിയ, എംഡി, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ച്. കോളം ഒരു C18 ഇനേർട്ട്‌സിൽ റിവേഴ്‌സ് ഫേസ് കോളമായിരുന്നു (250 എംഎം × 4.6 എംഎം; ആർപി സി-18, ഒഡിഎസ്-3, 5u; ജിഎൽ സയൻസസ്, ടോറൻസ്, സിഎ, യുഎസ്എ). പ്രാരംഭ മൊബൈൽ ഫേസ് അവസ്ഥകൾ വെള്ളത്തിൽ 12% മെഥനോൾ/88% 0.01 എം ടെട്രാബ്യൂട്ടിലാമോണിയം ഹൈഡ്രോക്സൈഡ് (ടിബിഎഎച്ച്; സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച്, സെന്റ് ലൂയിസ്, എംഒ, യുഎസ്എ) ആയി സജ്ജീകരിച്ചു, 1 മില്ലി/മിനിറ്റ് ഫ്ലോ റേറ്റ്. 15 μl സാമ്പിൾ കുത്തിവച്ച ശേഷം, പ്രാരംഭ അവസ്ഥകൾ 20 മിനിറ്റ് നിലനിർത്തി, തുടർന്ന് ലായക അനുപാതം 100% മെഥനോൾ ആയി ക്രമീകരിച്ചു, മൊത്തം സാമ്പിൾ വിശകലന സമയം 65 മിനിറ്റ്. പുതുതായി തയ്യാറാക്കിയ സിനാപൈൻ, ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റ്, മൈറോസിൻ മാനദണ്ഡങ്ങൾ (സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച്, സെന്റ് ലൂയിസ്, എംഒ, യുഎസ്എ) എന്നിവയുടെ സീരിയൽ നേർപ്പിക്കലിലൂടെ ഒരു സ്റ്റാൻഡേർഡ് കർവ് (nM/mAb അടിസ്ഥാനമാക്കി) സൃഷ്ടിച്ചു. കൊഴുപ്പു കുറഞ്ഞ വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിലെ സൾഫറിന്റെ അളവ് കണക്കാക്കാൻ ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകൾ. സാമ്പിളുകളിലെ ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റ് സാന്ദ്രത, അതേ കോളം സജ്ജീകരിച്ചിരിക്കുന്ന ഓപ്പൺലാബ് സിഡിഎസ് കെംസ്റ്റേഷൻ പതിപ്പ് (സി.01.07 എസ്ആർ2 [255]) ഉപയോഗിച്ച് ഒരു എജിലന്റ് 1100 എച്ച്പിഎൽസിയിൽ (എജിലന്റ്, സാന്താ ക്ലാര, സിഎ, യുഎസ്എ) പരീക്ഷിച്ചു, മുമ്പ് വിവരിച്ച രീതി ഉപയോഗിച്ചും. ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റ് സാന്ദ്രത നിർണ്ണയിച്ചു; എച്ച്പിഎൽസി സിസ്റ്റങ്ങൾക്കിടയിൽ താരതമ്യപ്പെടുത്താവുന്നതാണ്.
ഫിഷർ സയന്റിഫിക്കിൽ (തെർമോ ഫിഷർ സയന്റിഫിക്, വാൾത്താം, എംഎ, യുഎസ്എ) നിന്ന് ആലൈൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റും (94%, സ്ഥിരതയുള്ളത്) ബെൻസിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റും (98%) വാങ്ങി. കെംക്രൂസിൽ (സാന്താക്രൂസ് ബയോടെക്നോളജി, സിഎ, യുഎസ്എ) നിന്ന് 4-ഹൈഡ്രോക്സിബെൻസിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് വാങ്ങി. മൈറോസിനേസ് ഉപയോഗിച്ച് എൻസൈമാറ്റിക് ആയി ജലവിശ്ലേഷണം ചെയ്യുമ്പോൾ, ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകൾ, ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകൾ, ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകൾ എന്നിവ യഥാക്രമം ആലൈൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ്, ബെൻസിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ്, 4-ഹൈഡ്രോക്സിബെൻസിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് എന്നിവയായി മാറുന്നു.
മുതൂരി തുടങ്ങിയവർ 32-ന്റെ രീതി അനുസരിച്ച് ലബോറട്ടറി ബയോഅസെകൾ പരിഷ്കാരങ്ങളോടെ നടത്തി. പഠനത്തിൽ അഞ്ച് കൊഴുപ്പ് കുറഞ്ഞ വിത്ത് ഫീഡുകൾ ഉപയോഗിച്ചു: DFP, DFP-HT, IG, PG, Ls. 120 mL ഡീയോണൈസ്ഡ് വെള്ളം (dH2O) അടങ്ങിയ 400 mL ഡിസ്പോസിബിൾ ത്രീ-വേ ബീക്കറിൽ (VWR ഇന്റർനാഷണൽ, LLC, റാഡ്‌നോർ, PA, USA) ഇരുപത് ലാർവകളെ സ്ഥാപിച്ചു. കൊതുക് ലാർവ വിഷബാധയ്ക്കായി ഏഴ് വിത്ത് മീൽ സാന്ദ്രതകൾ പരിശോധിച്ചു: DFP സീഡ് മീൽ, DFP-HT, IG, PG എന്നിവയ്ക്ക് 0.01, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1, 0.12 ഗ്രാം സീഡ് മീൽ/120 ml dH2O. പ്രാഥമിക ബയോഅസെകൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് കൊഴുപ്പ് കുറഞ്ഞ Ls വിത്ത് മാവ് പരിശോധിച്ച മറ്റ് നാല് വിത്ത് മാവുകളേക്കാൾ വിഷാംശം കൂടുതലാണെന്നാണ്. അതിനാൽ, Ls സീഡ് മീലിന്റെ ഏഴ് സംസ്കരണ സാന്ദ്രതകൾ ഇനിപ്പറയുന്ന സാന്ദ്രതകളിലേക്ക് ഞങ്ങൾ ക്രമീകരിച്ചു: 0.015, 0.025, 0.035, 0.045, 0.055, 0.065, 0.075 g/120 mL dH2O.
പരിശോധനാ സാഹചര്യങ്ങളിൽ സാധാരണ പ്രാണികളുടെ മരണനിരക്ക് വിലയിരുത്തുന്നതിന് ഒരു ചികിത്സയില്ലാത്ത നിയന്ത്രണ ഗ്രൂപ്പ് (dH20, വിത്ത് ഭക്ഷണ സപ്ലിമെന്റ് ഇല്ല) ഉൾപ്പെടുത്തി. ഓരോ വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിനും വിഷശാസ്ത്രപരമായ ബയോഅസെകളിൽ മൂന്ന് റെപ്ലിക്കേറ്റ് ത്രീ-സ്ലോപ്പ് ബീക്കറുകൾ (ഒരു ബീക്കറിൽ 20 വൈകി മൂന്നാം ഇൻസ്റ്റാർ ലാർവകൾ) ഉൾപ്പെടുന്നു, ആകെ 108 കുപ്പികൾ. ചികിത്സിച്ച പാത്രങ്ങൾ മുറിയിലെ താപനിലയിൽ (20-21°C) സൂക്ഷിച്ചു, ചികിത്സ സാന്ദ്രതയിൽ 24 ഉം 72 മണിക്കൂറും തുടർച്ചയായി എക്സ്പോഷർ ചെയ്തപ്പോൾ ലാർവ മരണനിരക്ക് രേഖപ്പെടുത്തി. നേർത്ത സ്റ്റെയിൻലെസ് സ്റ്റീൽ സ്പാറ്റുല ഉപയോഗിച്ച് തുളയ്ക്കുമ്പോഴോ സ്പർശിക്കുമ്പോഴോ കൊതുകിന്റെ ശരീരവും അനുബന്ധങ്ങളും ചലിക്കുന്നില്ലെങ്കിൽ, കൊതുക് ലാർവകൾ ചത്തതായി കണക്കാക്കുന്നു. ചത്ത ലാർവകൾ സാധാരണയായി കണ്ടെയ്നറിന്റെ അടിയിലോ ജലത്തിന്റെ ഉപരിതലത്തിലോ ഒരു ഡോർസൽ അല്ലെങ്കിൽ വെൻട്രൽ സ്ഥാനത്ത് ചലനരഹിതമായി തുടരും. വ്യത്യസ്ത ദിവസങ്ങളിൽ വ്യത്യസ്ത ഗ്രൂപ്പുകളുടെ ലാർവകൾ ഉപയോഗിച്ച് പരീക്ഷണം മൂന്ന് തവണ ആവർത്തിച്ചു, ഓരോ ചികിത്സാ സാന്ദ്രതയിലും ആകെ 180 ലാർവകൾ.
AITC, BITC, 4-HBITC എന്നിവയുടെ വിഷാംശം കൊതുകിന്റെ ലാർവകൾക്ക് ഒരേ ബയോഅസെ നടപടിക്രമം ഉപയോഗിച്ചാണ് വിലയിരുത്തിയത്, പക്ഷേ വ്യത്യസ്ത ചികിത്സകൾ ഉപയോഗിച്ചു. 2-mL സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിൽ 900 µL കേവല എത്തനോളിൽ 100 ​​µL രാസവസ്തു ചേർത്ത് നന്നായി കലർത്തി 30 സെക്കൻഡ് കുലുക്കി ഓരോ രാസവസ്തുവിനും 100,000 ppm സ്റ്റോക്ക് ലായനികൾ തയ്യാറാക്കുക. ഞങ്ങളുടെ പ്രാഥമിക ബയോഅസെകളുടെ അടിസ്ഥാനത്തിലാണ് ചികിത്സാ സാന്ദ്രത നിർണ്ണയിച്ചത്, ഇത് BITC AITC, 4-HBITC എന്നിവയേക്കാൾ വളരെ വിഷാംശമുള്ളതാണെന്ന് കണ്ടെത്തി. വിഷാംശം നിർണ്ണയിക്കാൻ, 5 സാന്ദ്രത BITC (1, 3, 6, 9, 12 ppm), 7 സാന്ദ്രത AITC (5, 10, 15, 20, 25, 30, 35 ppm) ഉം 6 സാന്ദ്രത 4-HBITC (15, 15, 20, 25, 30, 35 ppm) ഉം ആവശ്യമാണ്. 30, 45, 60, 75, 90 ppm). നിയന്ത്രണ ചികിത്സയിൽ 108 μL കേവല എത്തനോൾ കുത്തിവച്ചു, ഇത് രാസ ചികിത്സയുടെ പരമാവധി അളവിന് തുല്യമാണ്. മുകളിൽ പറഞ്ഞതുപോലെ ബയോഅസെകൾ ആവർത്തിച്ചു, ഒരു ചികിത്സാ സാന്ദ്രതയിൽ ആകെ 180 ലാർവകളെ തുറന്നുകാട്ടി. 24 മണിക്കൂർ തുടർച്ചയായ എക്സ്പോഷറിന് ശേഷം AITC, BITC, 4-HBITC എന്നിവയുടെ ഓരോ സാന്ദ്രതയ്ക്കും ലാർവ മരണനിരക്ക് രേഖപ്പെടുത്തി.
50% മാരക സാന്ദ്രത (LC50), 90% മാരക സാന്ദ്രത (LC90), ചരിവ്, മാരക ഡോസ് ഗുണകം, 95% മാരക സാന്ദ്രത എന്നിവ കണക്കാക്കാൻ പോളോ സോഫ്റ്റ്‌വെയർ (Polo Plus, LeOra Software, പതിപ്പ് 1.0) ഉപയോഗിച്ച് 65 ഡോസ്-അനുബന്ധ മരണ ഡാറ്റയുടെ പ്രോബിറ്റ് വിശകലനം നടത്തി. ലോഗ്-ട്രാൻസ്ഫോർമഡ് കോൺസൺട്രേഷനും ഡോസ്-മോർട്ടാലിറ്റി കർവുകൾക്കും മാരക ഡോസ് അനുപാതങ്ങൾക്കായുള്ള കോൺഫിഡൻസ് ഇന്റർവെല്ലുകളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി. ഓരോ ചികിത്സാ സാന്ദ്രതയ്ക്കും വിധേയമാകുന്ന 180 ലാർവകളുടെ സംയോജിത റെപ്ലിക്കേറ്റ് ഡാറ്റയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയാണ് മരണ ഡാറ്റ. ഓരോ വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിനും ഓരോ രാസ ഘടകത്തിനും വെവ്വേറെ പ്രോബബിലിസ്റ്റിക് വിശകലനങ്ങൾ നടത്തി. മാരക ഡോസ് അനുപാതത്തിന്റെ 95% കോൺഫിഡൻസ് ഇന്റർവെല്ലിനെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, കൊതുക് ലാർവകളിലേക്കുള്ള വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെയും രാസ ഘടകങ്ങളുടെയും വിഷാംശം ഗണ്യമായി വ്യത്യസ്തമാണെന്ന് കണക്കാക്കപ്പെട്ടു, അതിനാൽ 1 മൂല്യം അടങ്ങിയ ഒരു കോൺഫിഡൻസ് ഇന്റർവെൽ കാര്യമായി വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നില്ല, P = 0.0566.
കൊഴുപ്പ് നീക്കം ചെയ്ത വിത്ത് മാവുകളിലെ പ്രധാന ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ നിർണ്ണയത്തിനായുള്ള HPLC ഫലങ്ങൾ പട്ടിക 1 ൽ പട്ടികപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്നു. പരിശോധിച്ച വിത്ത് മാവുകളിലെ പ്രധാന ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകൾ DFP, PG എന്നിവ ഒഴികെ വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നു, ഇവ രണ്ടിലും മൈറോസിനേസ് ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. PG-യിലെ മൈറോസിനിൻ ഉള്ളടക്കം DFP-യേക്കാൾ കൂടുതലായിരുന്നു, യഥാക്രമം 33.3 ± 1.5 ഉം 26.5 ± 0.9 mg/g ഉം. Ls വിത്ത് പൊടിയിൽ 36.6 ± 1.2 mg/g ഗ്ലൂക്കോഗ്ലൈക്കോണും, IG വിത്ത് പൊടിയിൽ 38.0 ± 0.5 mg/g സിനാപിനും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.
എഇയുടെ ലാർവകൾ. കൊഴുപ്പ് നീക്കം ചെയ്ത വിത്ത് ഭക്ഷണം ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ ഈഡിസ് ഈജിപ്തി കൊതുകുകൾ കൊല്ലപ്പെട്ടു, എന്നിരുന്നാലും സസ്യ ഇനങ്ങളെ ആശ്രയിച്ച് ചികിത്സയുടെ ഫലപ്രാപ്തി വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നു. 24, 72 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷറിന് ശേഷം DFP-NT മാത്രമേ കൊതുക് ലാർവകൾക്ക് വിഷാംശം നൽകിയിരുന്നില്ല (പട്ടിക 2). വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന സാന്ദ്രതയനുസരിച്ച് സജീവ വിത്ത് പൊടിയുടെ വിഷാംശം വർദ്ധിച്ചു (ചിത്രം 1A, B). 24 മണിക്കൂർ, 72 മണിക്കൂർ വിലയിരുത്തലുകളിൽ LC50 മൂല്യങ്ങളുടെ മാരകമായ ഡോസ് അനുപാതത്തിന്റെ 95% CI അടിസ്ഥാനമാക്കി കൊതുക് ലാർവകളിലേക്കുള്ള വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ വിഷാംശം ഗണ്യമായി വ്യത്യാസപ്പെട്ടു (പട്ടിക 3). 24 മണിക്കൂറിനുശേഷം, എൽഎസ് വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ വിഷാംശം മറ്റ് വിത്ത് ഭക്ഷണ ചികിത്സകളേക്കാൾ കൂടുതലായിരുന്നു, ലാർവകളിലേക്കുള്ള ഏറ്റവും ഉയർന്ന പ്രവർത്തനവും പരമാവധി വിഷാംശവും (LC50 = 0.04 ഗ്രാം/120 മില്ലി dH2O). IG, Ls, PG വിത്ത് പൊടി ചികിത്സകളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ 24 മണിക്കൂറിൽ ലാർവകൾക്ക് DFP യോട് സംവേദനക്ഷമത കുറവായിരുന്നു, LC50 മൂല്യങ്ങൾ യഥാക്രമം 0.115, 0.04, 0.08 g/120 ml dH2O ആയിരുന്നു, ഇവ LC50 മൂല്യത്തേക്കാൾ സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കനുസരിച്ച് കൂടുതലാണ്. 0.211 g/120 ml dH2O (പട്ടിക 3). DFP, IG, PG, Ls എന്നിവയുടെ LC90 മൂല്യങ്ങൾ യഥാക്രമം 0.376, 0.275, 0.137, 0.074 g/120 ml dH2O ആയിരുന്നു (പട്ടിക 2). DPP യുടെ ഏറ്റവും ഉയർന്ന സാന്ദ്രത 0.12 g/120 ml dH2O ആയിരുന്നു. 24 മണിക്കൂർ വിലയിരുത്തലിനുശേഷം, ശരാശരി ലാർവ മരണനിരക്ക് 12% മാത്രമായിരുന്നു, അതേസമയം IG, PG ലാർവകളുടെ ശരാശരി മരണനിരക്ക് യഥാക്രമം 51% ഉം 82% ഉം ആയി. 24 മണിക്കൂർ വിലയിരുത്തലിനുശേഷം, ഏറ്റവും ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയിലുള്ള Ls സീഡ് മീൽ ചികിത്സയ്ക്കുള്ള (0.075 ഗ്രാം/120 മില്ലി dH2O) ശരാശരി ലാർവ മരണനിരക്ക് 99% ആയിരുന്നു (ചിത്രം 1A).
Ae. ഈജിപ്ഷ്യൻ ലാർവകളുടെ (മൂന്നാം ഇൻസ്റ്റാർ ലാർവ) ഡോസ് പ്രതികരണം (പ്രോബിറ്റ്) മുതൽ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം 24 മണിക്കൂർ (A) നും 72 മണിക്കൂർ (B) നും ശേഷമുള്ള വിത്ത് ഭക്ഷണ സാന്ദ്രതയിലേക്കുള്ള മരണനിരക്ക് വക്രങ്ങൾ കണക്കാക്കി. ഡോട്ട് ഇട്ട രേഖ വിത്ത് ഭക്ഷണ ചികിത്സയുടെ LC50 നെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. DFP Thlaspi arvense, DFP-HT Heat inactivated Thlaspi arvense, IG Sinapsis alba (Ida Gold), PG Brassica juncea (Pacific Gold), Ls Lepidium sativum.
72 മണിക്കൂർ മൂല്യനിർണ്ണയത്തിൽ, DFP, IG, PG സീഡ് മീൽ എന്നിവയുടെ LC50 മൂല്യങ്ങൾ യഥാക്രമം 0.111, 0.085, 0.051 g/120 ml dH2O ആയിരുന്നു. Ls സീഡ് മീലിന് വിധേയമായ മിക്കവാറും എല്ലാ ലാർവകളും 72 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷറിന് ശേഷം മരിച്ചു, അതിനാൽ മരണനിരക്ക് പ്രോബിറ്റ് വിശകലനവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നില്ല. മറ്റ് സീഡ് മീലുകളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, ലാർവകൾക്ക് DFP സീഡ് മീൽ ചികിത്സയോട് സംവേദനക്ഷമത കുറവായിരുന്നു, കൂടാതെ സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കനുസരിച്ച് ഉയർന്ന LC50 മൂല്യങ്ങളുണ്ടായിരുന്നു (പട്ടിക 2 ഉം 3 ഉം). 72 മണിക്കൂറിനുശേഷം, DFP, IG, PG സീഡ് മീൽ ചികിത്സകൾക്കുള്ള LC50 മൂല്യങ്ങൾ യഥാക്രമം 0.111, 0.085, 0.05 g/120 ml dH2O ആയി കണക്കാക്കി. 72 മണിക്കൂർ മൂല്യനിർണ്ണയത്തിന് ശേഷം, DFP, IG, PG വിത്ത് പൊടികളുടെ LC90 മൂല്യങ്ങൾ യഥാക്രമം 0.215, 0.254, 0.138 g/120 ml dH2O ആയിരുന്നു. 72 മണിക്കൂർ മൂല്യനിർണ്ണയത്തിന് ശേഷം, 0.12 g/120 ml dH2O എന്ന പരമാവധി സാന്ദ്രതയിൽ DFP, IG, PG വിത്ത് ഭക്ഷണ ചികിത്സകൾക്കുള്ള ശരാശരി ലാർവ മരണനിരക്ക് യഥാക്രമം 58%, 66%, 96% ആയിരുന്നു (ചിത്രം 1B). 72 മണിക്കൂർ മൂല്യനിർണ്ണയത്തിന് ശേഷം, PG വിത്ത് ഭക്ഷണം IG, DFP വിത്ത് ഭക്ഷണത്തേക്കാൾ വിഷാംശം ഉള്ളതായി കണ്ടെത്തി.
സിന്തറ്റിക് ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകൾ, അല്ലൈൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് (AITC), ബെൻസിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് (BITC), 4-ഹൈഡ്രോക്സിബെൻസൈലിസോത്തിയോസയനേറ്റ് (4-HBITC) എന്നിവയ്ക്ക് കൊതുക് ലാർവകളെ ഫലപ്രദമായി കൊല്ലാൻ കഴിയും. ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം 24 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ, 5.29 ppm എന്ന LC50 മൂല്യമുള്ള BITC ലാർവകൾക്ക് കൂടുതൽ വിഷാംശം നൽകി, AITC-ക്ക് 19.35 ppm ഉം 4-HBITC-ക്ക് 55.41 ppm ഉം ആയിരുന്നു (പട്ടിക 4). AITC, BITC എന്നിവയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, 4-HBITC-ക്ക് കുറഞ്ഞ വിഷാംശവും ഉയർന്ന LC50 മൂല്യവുമുണ്ട്. ഏറ്റവും വീര്യം കൂടിയ വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിലെ രണ്ട് പ്രധാന ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകളുടെ (Ls, PG) കൊതുക് ലാർവ വിഷാംശത്തിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളുണ്ട്. AITC, BITC, 4-HBITC എന്നിവയ്ക്കിടയിലുള്ള LC50 മൂല്യങ്ങളുടെ മാരകമായ ഡോസ് അനുപാതത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള വിഷാംശം ഒരു സ്ഥിതിവിവരക്കണക്ക് വ്യത്യാസം കാണിച്ചു, അതായത് LC50 മാരകമായ ഡോസ് അനുപാതത്തിന്റെ 95% CI 1 എന്ന മൂല്യം ഉൾപ്പെടുത്തിയിട്ടില്ല (P = 0.05, പട്ടിക 4). BITC യുടെയും AITC യുടെയും ഉയർന്ന സാന്ദ്രത പരിശോധിച്ച ലാർവകളിൽ 100% ത്തെയും കൊല്ലുമെന്ന് കണക്കാക്കപ്പെട്ടിരുന്നു (ചിത്രം 2).
Ae യുടെ ഡോസ് പ്രതികരണത്തിൽ (Probit) നിന്നാണ് മരണനിരക്ക് കണക്കാക്കിയത്. ചികിത്സയ്ക്ക് 24 മണിക്കൂറിനു ശേഷം, ഈജിപ്ഷ്യൻ ലാർവകൾ (മൂന്നാം ഇൻസ്റ്റാർ ലാർവകൾ) സിന്തറ്റിക് ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് സാന്ദ്രതയിലെത്തി. ഡോട്ട് ഇട്ട രേഖ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് ചികിത്സയ്ക്കുള്ള LC50 നെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. ബെൻസിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് BITC, അല്ലൈൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് AITC, 4-HBITC എന്നിവ.
കൊതുക് വാഹക നിയന്ത്രണ ഏജന്റുകളായി സസ്യ ജൈവകീടനാശിനികളുടെ ഉപയോഗം വളരെക്കാലമായി പഠനവിധേയമാണ്. പല സസ്യങ്ങളും കീടനാശിനി പ്രവർത്തനമുള്ള പ്രകൃതിദത്ത രാസവസ്തുക്കൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു37. കൊതുകുകൾ ഉൾപ്പെടെയുള്ള കീടങ്ങളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിൽ വലിയ ശേഷിയുള്ള സിന്തറ്റിക് കീടനാശിനികൾക്ക് ആകർഷകമായ ഒരു ബദലാണ് അവയുടെ ജൈവിക സജീവ സംയുക്തങ്ങൾ.
കടുക് ചെടികൾ വിത്തുകൾക്കുള്ള വിളയായി വളർത്തുന്നു, സുഗന്ധവ്യഞ്ജനമായും എണ്ണയുടെ ഉറവിടമായും ഉപയോഗിക്കുന്നു. വിത്തുകളിൽ നിന്ന് കടുക് എണ്ണ വേർതിരിച്ചെടുക്കുമ്പോഴോ ജൈവ ഇന്ധനമായി ഉപയോഗിക്കുന്നതിനായി കടുക് വേർതിരിച്ചെടുക്കുമ്പോഴോ, [69] ഉപോൽപ്പന്നം കൊഴുപ്പ് നീക്കം ചെയ്ത വിത്ത് ഭക്ഷണമാണ്. ഈ വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിൽ അതിന്റെ പ്രകൃതിദത്ത ജൈവ രാസ ഘടകങ്ങളും ജലവിശ്ലേഷണ എൻസൈമുകളും പലതും നിലനിർത്തുന്നു. ഈ വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ വിഷാംശം ഐസോതിയോസയനേറ്റുകളുടെ ഉത്പാദനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു55,60,61. വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ ജലാംശം സമയത്ത് മൈറോസിനേസ് എന്ന എൻസൈം ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ ജലവിശ്ലേഷണത്തിലൂടെയാണ് ഐസോതിയോസയനേറ്റുകൾ രൂപപ്പെടുന്നത്38,55,70, കൂടാതെ കുമിൾനാശിനി, ബാക്ടീരിയ നശിപ്പിക്കുന്ന, നിമറ്റിസൈഡൽ, കീടനാശിനി ഫലങ്ങൾ, അതുപോലെ രാസ സെൻസറി ഇഫക്റ്റുകൾ, കീമോതെറാപ്പിക് ഗുണങ്ങൾ എന്നിവയുൾപ്പെടെയുള്ള മറ്റ് ഗുണങ്ങളും ഉണ്ടെന്ന് അറിയപ്പെടുന്നു61,62,70. കടുക് സസ്യങ്ങളും വിത്ത് ഭക്ഷണവും മണ്ണിലെയും സംഭരിച്ചിരിക്കുന്ന ഭക്ഷ്യ കീടങ്ങളെയും നേരിടാൻ ഫലപ്രദമായി ഫ്യൂമിഗന്റുകളായി പ്രവർത്തിക്കുന്നുവെന്ന് നിരവധി പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്57,59,71,72. ഈ പഠനത്തിൽ, നാല് വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെയും അതിന്റെ മൂന്ന് ബയോ ആക്റ്റീവ് ഉൽപ്പന്നങ്ങളായ AITC, BITC, 4-HBITC എന്നിവയുടെയും വിഷാംശം ഞങ്ങൾ വിലയിരുത്തി. ഈഡിസ് ഈജിപ്തി. കൊതുക് ലാർവകൾ അടങ്ങിയ വെള്ളത്തിൽ നേരിട്ട് വിത്ത് ഭക്ഷണം ചേർക്കുന്നത് കൊതുക് ലാർവകൾക്ക് വിഷാംശമുള്ള ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന എൻസൈമാറ്റിക് പ്രക്രിയകളെ സജീവമാക്കുമെന്ന് പ്രതീക്ഷിക്കുന്നു. വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനവും ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് കുള്ളൻ കടുക് വിത്ത് ഭക്ഷണം ചൂടാക്കിയപ്പോൾ കീടനാശിനി പ്രവർത്തനത്തിന്റെ നഷ്ടവും ഈ ജൈവ പരിവർത്തനത്തിന്റെ ഒരു ഭാഗം പ്രകടമാക്കി. ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളെ സജീവമാക്കുന്ന ഹൈഡ്രോലൈറ്റിക് എൻസൈമുകളെ ചൂട് ചികിത്സ നശിപ്പിക്കുമെന്നും അതുവഴി ബയോ ആക്റ്റീവ് ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകൾ ഉണ്ടാകുന്നത് തടയുമെന്നും പ്രതീക്ഷിക്കുന്നു. ജല അന്തരീക്ഷത്തിൽ കൊതുകുകൾക്കെതിരെ കാബേജ് വിത്ത് പൊടിയുടെ കീടനാശിനി ഗുണങ്ങൾ സ്ഥിരീകരിക്കുന്ന ആദ്യ പഠനമാണിത്.
പരിശോധിച്ച വിത്ത് പൊടികളിൽ, വാട്ടർ ക്രെസ് വിത്ത് പൊടി (Ls) ആയിരുന്നു ഏറ്റവും വിഷാംശം ഉള്ളതിനാൽ Aedes albopictus ന്റെ ഉയർന്ന മരണനിരക്ക് ഉണ്ടായി. Aedes aegypti ലാർവകളെ 24 മണിക്കൂർ തുടർച്ചയായി സംസ്കരിച്ചു. ശേഷിക്കുന്ന മൂന്ന് വിത്ത് പൊടികളിൽ (PG, IG, DFP) പ്രവർത്തനം മന്ദഗതിയിലായിരുന്നു, 72 മണിക്കൂർ തുടർച്ചയായ ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷവും ഗണ്യമായ മരണത്തിന് കാരണമായി. Ls വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിൽ മാത്രമേ ഗണ്യമായ അളവിൽ ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകൾ അടങ്ങിയിട്ടുള്ളൂ, അതേസമയം PG യിലും DFP യിലും മൈറോസിനേസും IG യിലും പ്രധാന ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റായി ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റ് അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു (പട്ടിക 1). ഗ്ലൂക്കോട്രോപിയോലിൻ BITC യിലേക്ക് ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യപ്പെടുന്നു, സിനാൽബൈൻ 4-HBITC യിലേക്ക് ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യപ്പെടുന്നു61,62. ഞങ്ങളുടെ ബയോഅസെ ഫലങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് Ls വിത്ത് ഭക്ഷണവും സിന്തറ്റിക് BITC യും കൊതുക് ലാർവകൾക്ക് വളരെ വിഷാംശമുള്ളവയാണ്. PG, DFP വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ പ്രധാന ഘടകം myrosinase glucosinolate ആണ്, ഇത് AITC യിലേക്ക് ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യപ്പെടുന്നു. 19.35 ppm മൂല്യമുള്ള കൊതുക് ലാർവകളെ കൊല്ലുന്നതിൽ AITC ഫലപ്രദമാണ്. AITC, BITC എന്നിവയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, ലാർവകൾക്ക് ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ വിഷാംശം 4-HBITC ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് ആണ്. AITC BITC യേക്കാൾ വിഷാംശം കുറവാണെങ്കിലും, അവയുടെ LC50 മൂല്യങ്ങൾ കൊതുക് ലാർവകളിൽ പരീക്ഷിച്ച നിരവധി അവശ്യ എണ്ണകളേക്കാൾ കുറവാണ്32,73,74,75.
കൊതുക് ലാർവകൾക്കെതിരെ ഉപയോഗിക്കുന്നതിനുള്ള ഞങ്ങളുടെ ക്രൂസിഫറസ് വിത്ത് പൊടിയിൽ ഒരു പ്രധാന ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റ് അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, ഇത് HPLC നിർണ്ണയിക്കുന്ന മൊത്തം ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ 98-99% ത്തിലധികം വരും. മറ്റ് ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ ചെറിയ അളവ് കണ്ടെത്തി, പക്ഷേ അവയുടെ അളവ് മൊത്തം ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ 0.3% ൽ താഴെയായിരുന്നു. വാട്ടർക്രെസ് (എൽ. സാറ്റിവം) വിത്ത് പൊടിയിൽ ദ്വിതീയ ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകൾ (സിനിഗ്രിൻ) അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, പക്ഷേ അവയുടെ അനുപാതം മൊത്തം ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ 1% ആണ്, അവയുടെ ഉള്ളടക്കം ഇപ്പോഴും തുച്ഛമാണ് (ഏകദേശം 0.4 mg/g വിത്ത് പൊടി). PG, DFP എന്നിവയിൽ ഒരേ പ്രധാന ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റ് (മൈറോസിൻ) അടങ്ങിയിട്ടുണ്ടെങ്കിലും, അവയുടെ വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം അവയുടെ LC50 മൂല്യങ്ങൾ കാരണം ഗണ്യമായി വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. പൗഡറി മിൽഡ്യൂവിനുള്ള വിഷാംശത്തിൽ വ്യത്യാസമുണ്ട്. ഈഡിസ് ഈജിപ്തി ലാർവകളുടെ ആവിർഭാവം മൈറോസിനേസ് പ്രവർത്തനത്തിലെ വ്യത്യാസങ്ങൾ മൂലമോ രണ്ട് വിത്ത് തീറ്റകൾക്കിടയിലുള്ള സ്ഥിരത മൂലമോ ആകാം. ബ്രാസിക്കേസി സസ്യങ്ങളിലെ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകൾ പോലുള്ള ജലവിശ്ലേഷണ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ ജൈവ ലഭ്യതയിൽ മൈറോസിനേസ് പ്രവർത്തനം ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു76. പോക്കോക്ക് തുടങ്ങിയവർ, വിൽക്കിൻസൺ തുടങ്ങിയവർ എന്നിവരുടെ മുൻ റിപ്പോർട്ടുകൾ കാണിക്കുന്നത് മൈറോസിനേസ് പ്രവർത്തനത്തിലും സ്ഥിരതയിലുമുള്ള മാറ്റങ്ങൾ ജനിതക, പാരിസ്ഥിതിക ഘടകങ്ങളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കാമെന്നാണ്.
24 മണിക്കൂറിലും 72 മണിക്കൂറിലും (പട്ടിക 5) ഓരോ വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെയും LC50 മൂല്യങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, അനുബന്ധ രാസ പ്രയോഗങ്ങളുമായി താരതമ്യം ചെയ്യുന്നതിനായി പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന ബയോആക്ടീവ് ഐസോതിയോസയനേറ്റ് ഉള്ളടക്കം കണക്കാക്കി. 24 മണിക്കൂറിനു ശേഷം, വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിലെ ഐസോതിയോസയനേറ്റുകൾ ശുദ്ധമായ സംയുക്തങ്ങളേക്കാൾ കൂടുതൽ വിഷാംശം ഉള്ളവയായിരുന്നു. ഐസോതിയോസയനേറ്റ് വിത്ത് ചികിത്സയുടെ പാർട്സ് പെർ മില്യൺ (ppm) അടിസ്ഥാനമാക്കി കണക്കാക്കിയ LC50 മൂല്യങ്ങൾ BITC, AITC, 4-HBITC ആപ്ലിക്കേഷനുകൾക്കുള്ള LC50 മൂല്യങ്ങളേക്കാൾ കുറവായിരുന്നു. വിത്ത് ഭക്ഷണ ഗുളികകൾ കഴിക്കുന്ന ലാർവകളെ ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു (ചിത്രം 3A). തൽഫലമായി, വിത്ത് ഭക്ഷണ ഗുളികകൾ കഴിക്കുന്നതിലൂടെ ലാർവകൾക്ക് വിഷ ഐസോതിയോസയനേറ്റുകളിലേക്ക് കൂടുതൽ സാന്ദ്രീകൃത എക്സ്പോഷർ ലഭിച്ചേക്കാം. 24-മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷറിൽ IG, PG വിത്ത് ഭക്ഷണ ചികിത്സകളിൽ ഇത് ഏറ്റവും പ്രകടമായിരുന്നു, അവിടെ LC50 സാന്ദ്രത ശുദ്ധമായ AITC, 4-HBITC ചികിത്സകളേക്കാൾ യഥാക്രമം 75% ഉം 72% ഉം കുറവായിരുന്നു. Ls, DFP ചികിത്സകൾ ശുദ്ധമായ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റിനെക്കാൾ വിഷാംശം ഉള്ളവയായിരുന്നു, LC50 മൂല്യങ്ങൾ യഥാക്രമം 24% ഉം 41% ഉം കുറവാണ്. നിയന്ത്രണ ചികിത്സയിലെ ലാർവകൾ വിജയകരമായി പ്യൂപ്പയായി (ചിത്രം 3B), അതേസമയം വിത്ത് ഭക്ഷണ ചികിത്സയിലെ മിക്ക ലാർവകളും പ്യൂപ്പയായി മാറിയില്ല, ലാർവ വികസനം ഗണ്യമായി വൈകി (ചിത്രം 3B,D). സ്പോഡോപ്റ്റെറാലിറ്റുറയിൽ, ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകൾ വളർച്ചാ മാന്ദ്യവും വികസന കാലതാമസവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു79.
എഇ ലാർവകളെ. ഈഡിസ് ഈജിപ്തി കൊതുകുകൾ 24–72 മണിക്കൂർ തുടർച്ചയായി ബ്രാസിക്ക വിത്ത് പൊടിയുമായി സമ്പർക്കത്തിൽ വരുത്തി. (എ) വായ് ഭാഗങ്ങളിൽ വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ കണികകളുള്ള ചത്ത ലാർവകൾ (വൃത്താകൃതിയിൽ); (ബി) നിയന്ത്രണ ചികിത്സ (വിത്ത് ഭക്ഷണമില്ലാതെ dH20) കാണിക്കുന്നത് ലാർവകൾ സാധാരണയായി വളരുകയും 72 മണിക്കൂറിനുശേഷം പ്യൂപ്പ ഘട്ടത്തിലേക്ക് കടക്കുകയും ചെയ്യുന്നു എന്നാണ് (സി, ഡി) വിത്ത് ഭക്ഷണത്തോടെ ചികിത്സിച്ച ലാർവകൾ; വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിൽ വളർച്ചയിൽ വ്യത്യാസങ്ങൾ കാണിക്കുകയും പ്യൂപ്പ ഘട്ടത്തിലേക്ക് കടക്കാതിരിക്കുകയും ചെയ്തു.
കൊതുക് ലാർവകളിൽ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകളുടെ വിഷ ഫലങ്ങളുടെ സംവിധാനം ഞങ്ങൾ പഠിച്ചിട്ടില്ല. എന്നിരുന്നാലും, ചുവന്ന അഗ്നി ഉറുമ്പുകളിൽ (സോളനോപ്സിസ് ഇൻവിക്റ്റ) മുൻ പഠനങ്ങൾ കാണിക്കുന്നത് ഗ്ലൂട്ടത്തയോൺ എസ്-ട്രാൻസ്ഫെറേസ് (ജിഎസ്ടി), എസ്റ്റെറേസ് (ഇഎസ്ടി) എന്നിവയുടെ തടസ്സം ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് ബയോ ആക്ടിവിറ്റിയുടെ പ്രധാന സംവിധാനമാണെന്നും, കുറഞ്ഞ പ്രവർത്തനത്തിൽ പോലും എഐടിസിക്ക് ജിഎസ്ടി പ്രവർത്തനത്തെയും തടയാൻ കഴിയുമെന്നും. കുറഞ്ഞ സാന്ദ്രതയിൽ ചുവന്ന ഇറക്കുമതി ചെയ്ത തീ ഉറുമ്പുകൾ. ഡോസ് 0.5 µg/ml80 ആണ്. ഇതിനു വിപരീതമായി, മുതിർന്ന കോൺ വീവിലുകളിൽ (സിറ്റോഫിലസ് സീമൈസ്) AITC അസറ്റൈൽകോളിനെസ്റ്ററേസിനെ തടയുന്നു 81. കൊതുക് ലാർവകളിലെ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് പ്രവർത്തനത്തിന്റെ സംവിധാനം വ്യക്തമാക്കുന്നതിന് സമാനമായ പഠനങ്ങൾ നടത്തേണ്ടതുണ്ട്.
സസ്യ ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ ജലവിശ്ലേഷണം, പ്രതിപ്രവർത്തന ഐസോതിയോസയനേറ്റുകൾ രൂപപ്പെടുത്തുന്നത്, കടുക് വിത്ത് ഭക്ഷണം വഴി കൊതുക് ലാർവ നിയന്ത്രണത്തിനുള്ള ഒരു സംവിധാനമായി വർത്തിക്കുന്നു എന്ന നിർദ്ദേശത്തെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നതിനായി ഞങ്ങൾ ചൂട്-നിർജ്ജീവമാക്കിയ DFP ചികിത്സ ഉപയോഗിക്കുന്നു. പരീക്ഷിച്ച പ്രയോഗ നിരക്കുകളിൽ DFP-HT വിത്ത് ഭക്ഷണം വിഷാംശം ഉള്ളതായിരുന്നില്ല. ഉയർന്ന താപനിലയിൽ ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകൾ അപചയത്തിന് സംവേദനക്ഷമതയുള്ളതാണെന്ന് ലഫാർഗ തുടങ്ങിയവർ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിലെ മൈറോസിനേസ് എൻസൈമിനെ ഡീനേച്ചർ ചെയ്യുകയും ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുടെ ജലവിശ്ലേഷണം തടയുകയും റിയാക്ടീവ് ഐസോതിയോസയനേറ്റുകൾ രൂപപ്പെടുന്നത് തടയുകയും ചെയ്യുമെന്ന് ചൂട് ചികിത്സ പ്രതീക്ഷിക്കുന്നു. ഒകുനാഡെ തുടങ്ങിയവർ ഇത് സ്ഥിരീകരിച്ചു. 75 മൈറോസിനേസ് താപനില സെൻസിറ്റീവ് ആണെന്ന് കാണിച്ചു, കടുക്, കറുത്ത കടുക്, ബ്ലഡ്റൂട്ട് വിത്തുകൾ 80°-ൽ കൂടുതലുള്ള താപനിലയിൽ തുറന്നുകാണിക്കുമ്പോൾ മൈറോസിനേസ് പ്രവർത്തനം പൂർണ്ണമായും നിർജ്ജീവമായി. C. ചൂട് ചികിത്സിച്ച DFP വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ കീടനാശിനി പ്രവർത്തനം നഷ്ടപ്പെടാൻ ഈ സംവിധാനങ്ങൾ കാരണമായേക്കാം.
അതിനാൽ, കടുക് വിത്ത് ഭക്ഷണവും അതിന്റെ മൂന്ന് പ്രധാന ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകളും കൊതുകിന്റെ ലാർവകൾക്ക് വിഷമാണ്. വിത്ത് ഭക്ഷണവും രാസ ചികിത്സയും തമ്മിലുള്ള ഈ വ്യത്യാസങ്ങൾ കണക്കിലെടുക്കുമ്പോൾ, വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ ഉപയോഗം കൊതുക് നിയന്ത്രണത്തിന് ഫലപ്രദമായ ഒരു രീതിയായിരിക്കാം. വിത്ത് പൊടികളുടെ ഉപയോഗത്തിന്റെ ഫലപ്രാപ്തിയും സ്ഥിരതയും മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നതിന് അനുയോജ്യമായ ഫോർമുലേഷനുകളും ഫലപ്രദമായ വിതരണ സംവിധാനങ്ങളും തിരിച്ചറിയേണ്ടതുണ്ട്. സിന്തറ്റിക് കീടനാശിനികൾക്ക് പകരമായി കടുക് വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ സാധ്യതയെക്കുറിച്ച് ഞങ്ങളുടെ ഫലങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. കൊതുക് രോഗകാരികളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു നൂതന ഉപകരണമായി ഈ സാങ്കേതികവിദ്യ മാറിയേക്കാം. കൊതുക് ലാർവകൾ ജല പരിതസ്ഥിതികളിൽ വളരുന്നതിനാലും വിത്ത് ഭക്ഷണ ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകൾ ജലാംശം ലഭിക്കുമ്പോൾ എൻസൈമാറ്റിക് ആയി സജീവ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകളായി പരിവർത്തനം ചെയ്യപ്പെടുന്നതിനാലും, കൊതുക് ബാധിച്ച വെള്ളത്തിൽ കടുക് വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെ ഉപയോഗം ഗണ്യമായ നിയന്ത്രണ സാധ്യത നൽകുന്നു. ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകളുടെ ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം വ്യത്യാസപ്പെടുന്നുണ്ടെങ്കിലും (BITC > AITC > 4-HBITC), വിത്ത് ഭക്ഷണത്തെ ഒന്നിലധികം ഗ്ലൂക്കോസിനോലേറ്റുകളുമായി സംയോജിപ്പിക്കുന്നത് വിഷാംശം വർദ്ധിപ്പിക്കുമോ എന്ന് നിർണ്ണയിക്കാൻ കൂടുതൽ ഗവേഷണം ആവശ്യമാണ്. കൊഴുപ്പില്ലാത്ത ക്രൂസിഫറസ് വിത്ത് ഭക്ഷണത്തിന്റെയും മൂന്ന് ബയോആക്ടീവ് ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകളുടെയും കൊതുകുകളിൽ കീടനാശിനി ഫലങ്ങൾ തെളിയിക്കുന്ന ആദ്യ പഠനമാണിത്. വിത്തുകളിൽ നിന്ന് എണ്ണ വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്നതിന്റെ ഉപോൽപ്പന്നമായ കൊഴുപ്പില്ലാത്ത കാബേജ് വിത്ത് മീൽ, കൊതുക് നിയന്ത്രണത്തിന് ഒരു വാഗ്ദാനമായ ലാർവിസൈഡൽ ഏജന്റായി വർത്തിക്കുമെന്ന് കാണിക്കുന്നതിലൂടെ ഈ പഠനത്തിന്റെ ഫലങ്ങൾ പുതിയ വഴിത്തിരിവായി. സസ്യ ജൈവ നിയന്ത്രണ ഏജന്റുകളെ കണ്ടെത്തുന്നതിനും വിലകുറഞ്ഞതും പ്രായോഗികവും പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദപരവുമായ ജൈവ കീടനാശിനികളായി അവ വികസിപ്പിക്കുന്നതിനും ഈ വിവരങ്ങൾ സഹായിക്കും.
ഈ പഠനത്തിനായി സൃഷ്ടിച്ച ഡാറ്റാസെറ്റുകളും അതിന്റെ ഫലമായുണ്ടായ വിശകലനങ്ങളും ന്യായമായ അഭ്യർത്ഥന പ്രകാരം ബന്ധപ്പെട്ട രചയിതാവിൽ നിന്ന് ലഭ്യമാണ്. പഠനത്തിന്റെ അവസാനം, പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിച്ച എല്ലാ വസ്തുക്കളും (പ്രാണികളും വിത്ത് ഭക്ഷണവും) നശിപ്പിക്കപ്പെട്ടു.