ഈഡിസ് ഈജിപ്റ്റി (ഡിപ്റ്റെറ: കുലിസിഡേ) യ്‌ക്കെതിരെ ലാർവിസൈഡലായും മുതിർന്നവർക്കുള്ള പ്രതിവിധിയായും സസ്യ അവശ്യ എണ്ണകളെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ടെർപീൻ സംയുക്തങ്ങളുടെ സംയോജനം.

Nature.com സന്ദർശിച്ചതിന് നന്ദി. നിങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്ന ബ്രൗസറിന്റെ പതിപ്പിന് പരിമിതമായ CSS പിന്തുണ മാത്രമേ ഉള്ളൂ. മികച്ച ഫലങ്ങൾക്കായി, നിങ്ങളുടെ ബ്രൗസറിന്റെ പുതിയ പതിപ്പ് ഉപയോഗിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു (അല്ലെങ്കിൽ ഇന്റർനെറ്റ് എക്സ്പ്ലോററിൽ കോംപാറ്റിബിലിറ്റി മോഡ് പ്രവർത്തനരഹിതമാക്കുക). അതേസമയം, തുടർച്ചയായ പിന്തുണ ഉറപ്പാക്കാൻ, സ്റ്റൈലിംഗോ ജാവാസ്ക്രിപ്റ്റോ ഇല്ലാതെ ഞങ്ങൾ സൈറ്റ് കാണിക്കുന്നു.
സസ്യജന്യ കീടനാശിനി സംയുക്തങ്ങളുടെ സംയോജനം കീടങ്ങൾക്കെതിരെ സിനർജിസ്റ്റിക് അല്ലെങ്കിൽ വിരുദ്ധ ഇടപെടലുകൾ പ്രകടിപ്പിച്ചേക്കാം. ഈഡിസ് കൊതുകുകൾ വഹിക്കുന്ന രോഗങ്ങളുടെ ദ്രുതഗതിയിലുള്ള വ്യാപനവും പരമ്പരാഗത കീടനാശിനികളോടുള്ള ഈഡിസ് കൊതുകുകളുടെ വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന പ്രതിരോധവും കണക്കിലെടുത്ത്, സസ്യ അവശ്യ എണ്ണകളെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ടെർപീൻ സംയുക്തങ്ങളുടെ ഇരുപത്തിയെട്ട് കോമ്പിനേഷനുകൾ ഈഡിസ് ഈജിപ്തിയുടെ ലാർവ, മുതിർന്ന ഘട്ടങ്ങൾക്കെതിരെ രൂപപ്പെടുത്തി പരീക്ഷിച്ചു. ലാർവിസൈഡലിനും മുതിർന്നവർക്കുള്ള ഉപയോഗത്തിനും ഫലപ്രാപ്തിക്കായി അഞ്ച് സസ്യ അവശ്യ എണ്ണകൾ (EOs) തുടക്കത്തിൽ വിലയിരുത്തി, GC-MS ഫലങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി ഓരോ EO-യിലും രണ്ട് പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ തിരിച്ചറിഞ്ഞു. പ്രധാനമായും തിരിച്ചറിഞ്ഞ സംയുക്തങ്ങൾ വാങ്ങി, അതായത് ഡയാലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, ഡയാലിൽ ട്രൈസൾഫൈഡ്, കാർവോൺ, ലിമോണീൻ, യൂജെനോൾ, മീഥൈൽ യൂജെനോൾ, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ, യൂഡെസ്‌മോൾ, കൊതുക് ആൽഫ-പിനെൻ. ഈ സംയുക്തങ്ങളുടെ ബൈനറി കോമ്പിനേഷനുകൾ പിന്നീട് സബ്ലെത്തൽ ഡോസുകൾ ഉപയോഗിച്ച് തയ്യാറാക്കുകയും അവയുടെ സിനർജിസ്റ്റിക്, വിരുദ്ധ ഫലങ്ങൾ പരീക്ഷിക്കുകയും നിർണ്ണയിക്കുകയും ചെയ്തു. ലിമോണീൻ ഡയാലിൽ ഡൈസൾഫൈഡുമായി കലർത്തിയാണ് ഏറ്റവും മികച്ച ലാർവിസൈഡൽ കോമ്പോസിഷനുകൾ ലഭിക്കുന്നത്, കാർവോണും ലിമോണീനും കലർത്തിയാണ് ഏറ്റവും മികച്ച അഡൽറ്റിസൈഡൽ കോമ്പോസിഷനുകൾ ലഭിക്കുന്നത്. വാണിജ്യപരമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന സിന്തറ്റിക് ലാർവിസൈഡ് ടെംഫോസും മുതിർന്നവർക്കുള്ള മരുന്നായ മാലത്തിയോണും വെവ്വേറെയും ടെർപെനോയിഡുകളുമായി ബൈനറി കോമ്പിനേഷനുകളിലും പരീക്ഷിച്ചു. ടെമെഫോസ്, ഡയാലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, മാലത്തിയോൺ, യൂഡെസ്‌മോൾ എന്നിവയുടെ സംയോജനമാണ് ഏറ്റവും ഫലപ്രദമായ സംയോജനമെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു. ഈ ശക്തമായ കോമ്പിനേഷനുകൾ ഈഡിസ് ഈജിപ്തിക്കെതിരെ ഉപയോഗിക്കാനുള്ള സാധ്യതയുണ്ട്.
സസ്യ അവശ്യ എണ്ണകൾ (EOs) വിവിധ ബയോആക്ടീവ് സംയുക്തങ്ങൾ അടങ്ങിയ ദ്വിതീയ മെറ്റബോളിറ്റുകളാണ്, കൂടാതെ സിന്തറ്റിക് കീടനാശിനികൾക്ക് പകരമായി അവ കൂടുതൽ പ്രാധാന്യമർഹിക്കുന്നു. അവ പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദവും ഉപയോക്തൃ സൗഹൃദവുമാണ് മാത്രമല്ല, വ്യത്യസ്ത ബയോആക്ടീവ് സംയുക്തങ്ങളുടെ മിശ്രിതവുമാണ്, ഇത് മരുന്നുകളുടെ പ്രതിരോധം വികസിപ്പിക്കാനുള്ള സാധ്യതയും കുറയ്ക്കുന്നു1. GC-MS സാങ്കേതികവിദ്യ ഉപയോഗിച്ച്, ഗവേഷകർ വിവിധ സസ്യ അവശ്യ എണ്ണകളുടെ ഘടകങ്ങൾ പരിശോധിക്കുകയും 17,500 സുഗന്ധമുള്ള സസ്യങ്ങളിൽ നിന്ന് 3,000-ത്തിലധികം സംയുക്തങ്ങൾ തിരിച്ചറിയുകയും ചെയ്തു2, അവയിൽ മിക്കതും കീടനാശിനി ഗുണങ്ങൾക്കായി പരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു, അവയ്ക്ക് കീടനാശിനി ഫലങ്ങൾ ഉണ്ടെന്ന് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്3,4. സംയുക്തത്തിന്റെ പ്രധാന ഘടകത്തിന്റെ വിഷാംശം അതിന്റെ അസംസ്കൃത എഥിലീൻ ഓക്സൈഡിന് തുല്യമോ അതിൽ കൂടുതലോ ആണെന്ന് ചില പഠനങ്ങൾ എടുത്തുകാണിക്കുന്നു. എന്നാൽ രാസ കീടനാശിനികളുടെ കാര്യത്തിലെന്നപോലെ, വ്യക്തിഗത സംയുക്തങ്ങളുടെ ഉപയോഗം വീണ്ടും പ്രതിരോധം വികസിപ്പിക്കുന്നതിന് ഇടം നൽകിയേക്കാം5,6. അതിനാൽ, കീടനാശിനി ഫലപ്രാപ്തി മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നതിനും ലക്ഷ്യ കീട ജനസംഖ്യയിൽ പ്രതിരോധ സാധ്യത കുറയ്ക്കുന്നതിനും എഥിലീൻ ഓക്സൈഡ് അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള സംയുക്തങ്ങളുടെ മിശ്രിതങ്ങൾ തയ്യാറാക്കുന്നതിലാണ് നിലവിലെ ശ്രദ്ധ. EO-കളിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന വ്യക്തിഗത സജീവ സംയുക്തങ്ങൾ EO-യുടെ മൊത്തത്തിലുള്ള പ്രവർത്തനത്തെ പ്രതിഫലിപ്പിക്കുന്ന സംയോജനങ്ങളിൽ സിനർജിസ്റ്റിക് അല്ലെങ്കിൽ വിരുദ്ധ ഫലങ്ങൾ പ്രകടിപ്പിച്ചേക്കാം, മുൻ ഗവേഷകർ നടത്തിയ പഠനങ്ങളിൽ ഇത് നന്നായി ഊന്നിപ്പറഞ്ഞിട്ടുണ്ട്7,8. വെക്റ്റർ നിയന്ത്രണ പരിപാടിയിൽ EO-യും അതിന്റെ ഘടകങ്ങളും ഉൾപ്പെടുന്നു. ക്യൂലക്സ്, അനോഫിലിസ് കൊതുകുകളിൽ അവശ്യ എണ്ണകളുടെ കൊതുകുനാശിനി പ്രവർത്തനം വിപുലമായി പഠിച്ചിട്ടുണ്ട്. മൊത്തത്തിലുള്ള വിഷാംശം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും പാർശ്വഫലങ്ങൾ കുറയ്ക്കുന്നതിനും വിവിധ സസ്യങ്ങളെ വാണിജ്യപരമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന സിന്തറ്റിക് കീടനാശിനികളുമായി സംയോജിപ്പിച്ച് ഫലപ്രദമായ കീടനാശിനികൾ വികസിപ്പിക്കാൻ നിരവധി പഠനങ്ങൾ ശ്രമിച്ചിട്ടുണ്ട്9. എന്നാൽ ഈഡിസ് ഈജിപ്റ്റിക്കെതിരെ അത്തരം സംയുക്തങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള പഠനങ്ങൾ അപൂർവമായി തുടരുന്നു. വൈദ്യശാസ്ത്രത്തിലെ പുരോഗതിയും മരുന്നുകളുടെയും വാക്സിനുകളുടെയും വികസനവും ചില വെക്റ്റർ വഴി പകരുന്ന രോഗങ്ങളെ ചെറുക്കാൻ സഹായിച്ചിട്ടുണ്ട്. എന്നാൽ ഈഡിസ് ഈജിപ്റ്റി കൊതുക് പകരുന്ന വൈറസിന്റെ വ്യത്യസ്ത സെറോടൈപ്പുകളുടെ സാന്നിധ്യം വാക്സിനേഷൻ പ്രോഗ്രാമുകളുടെ പരാജയത്തിലേക്ക് നയിച്ചു. അതിനാൽ, അത്തരം രോഗങ്ങൾ ഉണ്ടാകുമ്പോൾ, രോഗവ്യാപനം തടയാനുള്ള ഏക മാർഗം വെക്റ്റർ നിയന്ത്രണ പരിപാടികളാണ്. നിലവിലെ സാഹചര്യത്തിൽ, വിവിധ വൈറസുകളുടെയും ഡെങ്കിപ്പനി, സിക്ക, ഡെങ്കി രക്തസ്രാവ പനി, മഞ്ഞപ്പനി മുതലായവയ്ക്ക് കാരണമാകുന്ന അവയുടെ സെറോടൈപ്പുകളുടെയും ഒരു പ്രധാന വാഹകനായ ഈഡിസ് ഈജിപ്തിയുടെ നിയന്ത്രണം വളരെ പ്രധാനമാണ്. ഏറ്റവും ശ്രദ്ധേയമായ കാര്യം, ഈജിപ്തിൽ എല്ലാ വെക്റ്റർ വഴി പകരുന്ന ഈഡിസ് വഴി പകരുന്ന രോഗങ്ങളുടെയും എണ്ണം എല്ലാ വർഷവും വർദ്ധിച്ചുകൊണ്ടിരിക്കുകയും ലോകമെമ്പാടും വർദ്ധിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു എന്നതാണ്. അതിനാൽ, ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, ഈഡിസ് ഈജിപ്തി ജനസംഖ്യയ്ക്കായി പരിസ്ഥിതി സൗഹൃദവും ഫലപ്രദവുമായ നിയന്ത്രണ നടപടികൾ വികസിപ്പിക്കേണ്ടതിന്റെ അടിയന്തിര ആവശ്യകതയുണ്ട്. ഇക്കാര്യത്തിൽ സാധ്യതയുള്ള സ്ഥാനാർത്ഥികൾ EO-കൾ, അവയുടെ ഘടക സംയുക്തങ്ങൾ, അവയുടെ സംയോജനങ്ങൾ എന്നിവയാണ്. അതിനാൽ, ഈഡിസ് ഈജിപ്തിക്കെതിരെ കീടനാശിനി ഗുണങ്ങളുള്ള അഞ്ച് സസ്യങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള (അതായത്, പുതിന, ഹോളി ബേസിൽ, യൂക്കാലിപ്റ്റസ് സ്‌പോട്ടഡ്, അല്ലിയം സൾഫർ, മെലാലൂക്ക) പ്രധാന സസ്യ EO സംയുക്തങ്ങളുടെ ഫലപ്രദമായ സിനർജിസ്റ്റിക് കോമ്പിനേഷനുകൾ തിരിച്ചറിയാൻ ഈ പഠനം ശ്രമിച്ചു.
തിരഞ്ഞെടുത്ത എല്ലാ EO-കളും 0.42 മുതൽ 163.65 ppm വരെയുള്ള 24-h LC50 ഉള്ള ഈഡിസ് ഈജിപ്തിക്കെതിരെ സാധ്യതയുള്ള ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം കാണിച്ചു. 24 മണിക്കൂറിൽ 0.42 ppm എന്ന LC50 മൂല്യമുള്ള പെപ്പർമിന്റ് (Mp) EO-യ്‌ക്കും, തുടർന്ന് 24 മണിക്കൂറിൽ 16.19 ppm എന്ന LC50 മൂല്യമുള്ള വെളുത്തുള്ളി (As)-നും ഏറ്റവും ഉയർന്ന ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം രേഖപ്പെടുത്തി (പട്ടിക 1).
Ocimum Saintum, Os EO ഒഴികെ, മറ്റ് നാല് സ്ക്രീനിംഗ് ചെയ്ത EO-കളും വ്യക്തമായ അലർജിക്ലാസ്റ്റിക് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു, 24 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷർ കാലയളവിൽ LC50 മൂല്യങ്ങൾ 23.37 മുതൽ 120.16 ppm വരെയാണ്. എക്സ്പോഷർ ചെയ്തതിന് 24 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ 23.37 ppm എന്ന LC50 മൂല്യമുള്ള മുതിർന്നവരെ കൊല്ലുന്നതിൽ തൈമോഫിലസ് സ്ട്രിയാറ്റ (Cl) EO ഏറ്റവും ഫലപ്രദമാണ്, തുടർന്ന് 101.91 ppm എന്ന LC50 മൂല്യമുള്ള യൂക്കാലിപ്റ്റസ് മക്കുലേറ്റ (Em) (പട്ടിക 1). മറുവശത്ത്, ഏറ്റവും ഉയർന്ന അളവിൽ 53% എന്ന ഉയർന്ന മരണനിരക്ക് രേഖപ്പെടുത്തിയതിനാൽ Os-നുള്ള LC50 മൂല്യം ഇതുവരെ നിർണ്ണയിക്കപ്പെട്ടിട്ടില്ല (അനുബന്ധ ചിത്രം 3).
ഓരോ EO യിലെയും രണ്ട് പ്രധാന ഘടക സംയുക്തങ്ങളെ NIST ലൈബ്രറി ഡാറ്റാബേസ് ഫലങ്ങൾ, GC ക്രോമാറ്റോഗ്രാം വിസ്തീർണ്ണ ശതമാനം, MS സ്പെക്ട്ര ഫലങ്ങൾ (പട്ടിക 2) എന്നിവയെ അടിസ്ഥാനമാക്കി തിരിച്ചറിഞ്ഞു. EO A യ്ക്ക്, തിരിച്ചറിഞ്ഞ പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ ഡയാലിൽ ഡൈസൾഫൈഡും ഡയാലിൽ ട്രൈസൾഫൈഡും ആയിരുന്നു; EO Mp യ്ക്ക് തിരിച്ചറിഞ്ഞ പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ കാർവോൺ, ലിമോണീൻ എന്നിവയായിരുന്നു, EO Em ന് തിരിച്ചറിഞ്ഞ പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ യൂഡെസ്മോൾ, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ എന്നിവയായിരുന്നു; EO Os ന്, തിരിച്ചറിഞ്ഞ പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ യൂജെനോൾ, മീഥൈൽ യൂജെനോൾ എന്നിവയായിരുന്നു, EO Cl ന്, തിരിച്ചറിഞ്ഞ പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ യൂജെനോൾ, α-പിനെൻ എന്നിവയായിരുന്നു (ചിത്രം 1, അനുബന്ധ ചിത്രങ്ങൾ 5–8, അനുബന്ധ പട്ടിക 1–5).
തിരഞ്ഞെടുത്ത അവശ്യ എണ്ണകളുടെ (എ-ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്; ബി-ഡയലിൽ ട്രൈസൾഫൈഡ്; സി-യൂജെനോൾ; ഡി-മീഥൈൽ യൂജെനോൾ; ഇ-ലിമോണീൻ; എഫ്-ആരോമാറ്റിക് സെപെറോൺ; ജി-α-പിനെൻ; എച്ച്-സിനിയോൾ; ആർ-യൂഡമോൾ) പ്രധാന ടെർപെനോയിഡുകളുടെ മാസ് സ്പെക്ട്രോമെട്രിയുടെ ഫലങ്ങൾ.
EO യുടെ പ്രധാന ഘടകങ്ങളായ ഫലപ്രദമായ സംയുക്തങ്ങളായി ആകെ ഒമ്പത് സംയുക്തങ്ങൾ (ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, ഡയലിൽ ട്രൈസൾഫൈഡ്, യൂജെനോൾ, മീഥൈൽ യൂജെനോൾ, കാർവോൺ, ലിമോണീൻ, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ, യൂഡെസ്‌മോൾ, α-പിനെൻ) തിരിച്ചറിഞ്ഞു, ലാർവ ഘട്ടങ്ങളിൽ ഈഡിസ് ഈജിപ്തിക്കെതിരെ വ്യക്തിഗതമായി ബയോഅസൈസ് ചെയ്തു. 24 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷറിന് ശേഷം 2.25 ppm എന്ന LC50 മൂല്യമുള്ള യൂഡെസ്‌മോൾ സംയുക്തത്തിന് ഏറ്റവും ഉയർന്ന ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം ഉണ്ടായിരുന്നു. ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, ഡയലിൽ ട്രൈസൾഫൈഡ് എന്നീ സംയുക്തങ്ങൾക്ക് ലാർവിസൈഡൽ ഫലങ്ങളുണ്ടെന്ന് കണ്ടെത്തിയിട്ടുണ്ട്, ശരാശരി സബ്ലെത്തൽ ഡോസുകൾ 10-20 ppm പരിധിയിലാണ്. 63.35 ppm, 139.29 ppm എന്ന LC50 മൂല്യങ്ങളുള്ള യൂജെനോൾ, ലിമോണീൻ, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ എന്നീ സംയുക്തങ്ങൾക്ക് മിതമായ ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം വീണ്ടും നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു. 24 മണിക്കൂറിനു ശേഷം യഥാക്രമം 181.33 ppm ഉം (പട്ടിക 3). എന്നിരുന്നാലും, ഉയർന്ന അളവിൽ പോലും മീഥൈൽ യൂജെനോളിന്റെയും കാർവോണിന്റെയും കാര്യമായ ലാർവിസൈഡൽ സാധ്യത കണ്ടെത്തിയില്ല, അതിനാൽ LC50 മൂല്യങ്ങൾ കണക്കാക്കിയിട്ടില്ല (പട്ടിക 3). 24 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷറിൽ ഈഡിസ് ഈജിപ്തിക്കെതിരെ സിന്തറ്റിക് ലാർവിസൈഡായ ടെമെഫോസിന് ശരാശരി മാരകമായ സാന്ദ്രത 0.43 ppm ആയിരുന്നു (പട്ടിക 3, അനുബന്ധ പട്ടിക 6).
ഫലപ്രദമായ EO യുടെ പ്രധാന സംയുക്തങ്ങളായി ഏഴ് സംയുക്തങ്ങൾ (ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, ഡയലിൽ ട്രൈസൾഫൈഡ്, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ, α-പിനെൻ, യൂഡെസ്‌മോൾ, ലിമോണീൻ, കാർവോൺ) തിരിച്ചറിഞ്ഞു, മുതിർന്ന ഈജിപ്ഷ്യൻ ഈഡിസ് കൊതുകുകൾക്കെതിരെ വ്യക്തിഗതമായി പരീക്ഷിച്ചു. പ്രോബിറ്റ് റിഗ്രഷൻ വിശകലനം അനുസരിച്ച്, 24 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷർ സമയത്ത് 1.82 ppm എന്ന LC50 മൂല്യമുള്ള യൂഡെസ്‌മോളിന് ഏറ്റവും ഉയർന്ന ശേഷിയുണ്ടെന്ന് കണ്ടെത്തി, തുടർന്ന് 17.60 ppm എന്ന LC50 മൂല്യമുള്ള യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ. 140.79 മുതൽ 737.01 ppm വരെയുള്ള LC50s ഉള്ള മുതിർന്നവർക്ക് പരിശോധിച്ച ശേഷിക്കുന്ന അഞ്ച് സംയുക്തങ്ങൾ മിതമായ ദോഷകരമായിരുന്നു (പട്ടിക 3). സിന്തറ്റിക് ഓർഗാനോഫോസ്ഫറസ് മാലത്തിയോൺ യൂഡെസ്‌മോളിനേക്കാൾ ശക്തി കുറഞ്ഞതും മറ്റ് ആറ് സംയുക്തങ്ങളേക്കാൾ ഉയർന്നതുമായിരുന്നു, 24 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷർ കാലയളവിൽ 5.44 ppm എന്ന LC50 മൂല്യം (പട്ടിക 3, അനുബന്ധ പട്ടിക 6).
1:1 അനുപാതത്തിൽ LC50 ഡോസുകളുടെ ബൈനറി കോമ്പിനേഷനുകൾ രൂപപ്പെടുത്തുന്നതിനായി ഏഴ് ശക്തിയേറിയ ലെഡ് സംയുക്തങ്ങളും ഓർഗാനോഫോസ്ഫറസ് ടാംഫോസേറ്റും തിരഞ്ഞെടുത്തു. ആകെ 28 ബൈനറി കോമ്പിനേഷനുകൾ തയ്യാറാക്കി, ഈഡിസ് ഈജിപ്റ്റിക്കെതിരായ ലാർവിസൈഡൽ ഫലപ്രാപ്തിക്കായി പരീക്ഷിച്ചു. ഒമ്പത് കോമ്പിനേഷനുകൾ സിനർജിസ്റ്റിക് ആണെന്നും 14 കോമ്പിനേഷനുകൾ വിരുദ്ധമാണെന്നും അഞ്ച് കോമ്പിനേഷനുകൾ ലാർവിസൈഡൽ അല്ലെന്നും കണ്ടെത്തി. സിനർജിസ്റ്റിക് കോമ്പിനേഷനുകളിൽ, ഡയാലിൽ ഡൈസൾഫൈഡിന്റെയും ടെമോഫോളിന്റെയും സംയോജനമാണ് ഏറ്റവും ഫലപ്രദമായത്, 24 മണിക്കൂറിനുശേഷം 100% മരണനിരക്ക് നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു (പട്ടിക 4). അതുപോലെ, ഡയാലിൽ ഡൈസൾഫൈഡും യൂജെനോളും തൈമെറ്റ്ഫോസുമായി ചേർത്ത ലിമോണീൻ മിശ്രിതങ്ങൾ നല്ല സാധ്യത കാണിച്ചു, ലാർവ മരണനിരക്ക് 98.3% ആയി (പട്ടിക 5). ശേഷിക്കുന്ന 4 കോമ്പിനേഷനുകൾ, അതായത് യൂഡെസ്മോൾ പ്ലസ് യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ, യൂഡെസ്മോൾ പ്ലസ് ലിമോണീൻ, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ പ്ലസ് ആൽഫ-പിനെൻ, ആൽഫ-പിനെൻ പ്ലസ് ടെമെഫോസ് എന്നിവയും ഗണ്യമായ ലാർവിസൈഡൽ ഫലപ്രാപ്തി കാണിച്ചു, മരണനിരക്ക് 90% കവിയുന്നു. പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന മരണനിരക്ക് 60-75% ആണ്. (പട്ടിക 4). എന്നിരുന്നാലും, α-പിനെനീൻ അല്ലെങ്കിൽ യൂക്കാലിപ്റ്റസ് എന്നിവയുമായി ലിമോണീൻ സംയോജിപ്പിക്കുമ്പോൾ വിരുദ്ധ പ്രതികരണങ്ങൾ പ്രകടമായി. അതുപോലെ, യൂജെനോൾ, യൂക്കാലിപ്റ്റസ് അല്ലെങ്കിൽ യൂഡെസ്‌മോൾ അല്ലെങ്കിൽ ഡയലിൽ ട്രൈസൽഫൈഡ് എന്നിവയുമായി ടെമെഫോസിന്റെ മിശ്രിതങ്ങൾക്ക് വിരുദ്ധ ഫലങ്ങൾ ഉള്ളതായി കണ്ടെത്തിയിട്ടുണ്ട്. അതുപോലെ, ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, ഡയലിൽ ട്രൈസൽഫൈഡ് എന്നിവയുടെ സംയോജനവും ഈ സംയുക്തങ്ങളിൽ ഏതെങ്കിലും യൂഡെസ്‌മോൾ അല്ലെങ്കിൽ യൂജെനോൾ എന്നിവയുമായി സംയോജിപ്പിക്കുന്നതും ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനത്തിൽ വിരുദ്ധമാണ്. യൂഡെസ്‌മോൾ യൂജെനോൾ അല്ലെങ്കിൽ α-പിനെനീൻ എന്നിവയുമായി സംയോജിപ്പിക്കുമ്പോഴും വൈരുദ്ധ്യം റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്.
മുതിർന്നവരുടെ അസിഡിക് പ്രവർത്തനത്തിനായി പരീക്ഷിച്ച 28 ബൈനറി മിശ്രിതങ്ങളിൽ 7 എണ്ണം സിനർജിസ്റ്റിക് ആയിരുന്നു, 6 എണ്ണം ഫലിച്ചില്ല, 15 എണ്ണം വിരുദ്ധമായിരുന്നു. യൂക്കാലിപ്റ്റസുമായി യൂഡെസ്‌മോളും കാർവോണുമായി ലിമോണീനും ചേർന്ന മിശ്രിതങ്ങൾ മറ്റ് സിനർജിസ്റ്റിക് കോമ്പിനേഷനുകളെ അപേക്ഷിച്ച് കൂടുതൽ ഫലപ്രദമാണെന്ന് കണ്ടെത്തി, മരണനിരക്ക് 24 മണിക്കൂറിൽ യഥാക്രമം 76% ഉം 100% ഉം ആയിരുന്നു (പട്ടിക 5). ലിമോണീൻ, ഡയലിൽ ട്രൈസൽഫൈഡ് എന്നിവ ഒഴികെയുള്ള എല്ലാ സംയുക്തങ്ങളുടെയും സംയോജനത്തിലും മാലത്തിയോൺ ഒരു സിനർജിസ്റ്റിക് പ്രഭാവം പ്രകടിപ്പിക്കുന്നതായി നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്. മറുവശത്ത്, ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡിനും ഡയലിൽ ട്രൈസൽഫൈഡിനും ഇടയിൽ വൈരുദ്ധ്യം കണ്ടെത്തിയിട്ടുണ്ട്, കൂടാതെ അവയിലേതെങ്കിലും യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ, കാർവോൺ അല്ലെങ്കിൽ ലിമോണീൻ എന്നിവയുമായി സംയോജിപ്പിക്കുമ്പോഴും വൈരുദ്ധ്യം കണ്ടെത്തിയിട്ടുണ്ട്. അതുപോലെ, യൂഡെസ്‌മോൾ അല്ലെങ്കിൽ ലിമോണീൻ, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ കാർവോൺ അല്ലെങ്കിൽ ലിമോണീൻ, യൂഡെസ്‌മോൾ അല്ലെങ്കിൽ മാലത്തിയോൺ എന്നിവയുമായി ലിമോണീൻ എന്നിവയുടെ സംയോജനം വിരുദ്ധ ലാർവിസൈഡൽ ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു. ശേഷിക്കുന്ന ആറ് കോമ്പിനേഷനുകൾക്കും, പ്രതീക്ഷിച്ചതും നിരീക്ഷിച്ചതുമായ മരണനിരക്ക് തമ്മിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമില്ല (പട്ടിക 5).
സിനർജിസ്റ്റിക് ഇഫക്റ്റുകളുടെയും സബ്ലെത്തൽ ഡോസുകളുടെയും അടിസ്ഥാനത്തിൽ, ധാരാളം ഈഡിസ് ഈജിപ്റ്റി കൊതുകുകൾക്കെതിരെ അവയുടെ ലാർവിസൈഡൽ വിഷാംശം ഒടുവിൽ തിരഞ്ഞെടുക്കുകയും കൂടുതൽ പരീക്ഷിക്കുകയും ചെയ്തു. യൂജെനോൾ-ലിമോണീൻ, ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്-ലിമോണീൻ, ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്-ടൈംഫോസ് എന്നീ ബൈനറി കോമ്പിനേഷനുകൾ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ലാർവ മരണനിരക്ക് 100% ആണെന്നും, പ്രതീക്ഷിച്ച ലാർവ മരണനിരക്ക് യഥാക്രമം 76.48%, 72.16%, 63.4% ആണെന്നും ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു (പട്ടിക 6). ലിമോണീനിന്റെയും യൂഡെസ്മോളിന്റെയും സംയോജനം താരതമ്യേന കുറഞ്ഞ ഫലപ്രാപ്തി നേടി, 24 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷർ കാലയളവിൽ 88% ലാർവ മരണനിരക്ക് നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു (പട്ടിക 6). ചുരുക്കത്തിൽ, തിരഞ്ഞെടുത്ത നാല് ബൈനറി കോമ്പിനേഷനുകൾ വലിയ തോതിൽ പ്രയോഗിക്കുമ്പോൾ ഈഡിസ് ഈജിപ്റ്റിക്കെതിരെ സിനർജിസ്റ്റിക് ലാർവിസൈഡൽ ഇഫക്റ്റുകളും പ്രകടമാക്കി (പട്ടിക 6).
മുതിർന്ന ഈഡിസ് ഈജിപ്തിയുടെ വലിയ ജനസംഖ്യയെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനായി അഡൽറ്റോസിഡൽ ബയോഅസ്സേയ്ക്കായി മൂന്ന് സിനർജിസ്റ്റിക് കോമ്പിനേഷനുകൾ തിരഞ്ഞെടുത്തു. വലിയ പ്രാണികളുടെ കോളനികളിൽ പരീക്ഷിക്കുന്നതിനായി കോമ്പിനേഷനുകൾ തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നതിന്, ഞങ്ങൾ ആദ്യം രണ്ട് മികച്ച സിനർജിസ്റ്റിക് ടെർപീൻ കോമ്പിനേഷനുകളിൽ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിച്ചു, അതായത് കാർവോൺ പ്ലസ് ലിമോണീൻ, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ പ്ലസ് യൂഡെസ്മോൾ. രണ്ടാമതായി, സിന്തറ്റിക് ഓർഗാനോഫോസ്ഫേറ്റ് മാലത്തിയോൺ, ടെർപെനോയിഡുകൾ എന്നിവയുടെ സംയോജനത്തിൽ നിന്ന് മികച്ച സിനർജിസ്റ്റിക് കോമ്പിനേഷൻ തിരഞ്ഞെടുത്തു. ഏറ്റവും ഉയർന്ന മരണനിരക്കും സ്ഥാനാർത്ഥി ചേരുവകളുടെ വളരെ കുറഞ്ഞ LC50 മൂല്യങ്ങളും കാരണം വലിയ പ്രാണികളുടെ കോളനികളിൽ പരീക്ഷിക്കുന്നതിന് മാലത്തിയോൺ, യൂഡെസ്മോൾ എന്നിവയുടെ സംയോജനമാണ് ഏറ്റവും മികച്ച സംയോജനമെന്ന് ഞങ്ങൾ വിശ്വസിക്കുന്നു. α-പിനെൻ, ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, യൂക്കാലിപ്റ്റസ്, കാർവോൺ, യൂഡെസ്മോൾ എന്നിവയുമായി സംയോജിച്ച് മാലത്തിയോൺ സിനർജിസം പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു. എന്നാൽ LC50 മൂല്യങ്ങൾ പരിശോധിച്ചാൽ, യൂഡെസ്മോളിന് ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ മൂല്യമുണ്ട് (2.25 ppm). മാലത്തിയോൺ, α-പിനെൻ, ഡയാലി ഡൈസൾഫൈഡ്, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ, കാർവോൺ എന്നിവയുടെ കണക്കാക്കിയ LC50 മൂല്യങ്ങൾ യഥാക്രമം 5.4, 716.55, 166.02, 17.6, 140.79 ppm ആയിരുന്നു. ഈ മൂല്യങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് മാലത്തിയോൺ, യൂഡെസ്മോൾ എന്നിവയുടെ സംയോജനമാണ് ഡോസേജിന്റെ കാര്യത്തിൽ ഏറ്റവും മികച്ച സംയോജനം എന്നാണ്. കാർവോൺ പ്ലസ് ലിമോണീൻ, യൂഡെസ്മോൾ പ്ലസ് മാലത്തിയോൺ എന്നിവയുടെ സംയോജനത്തിൽ 100% മരണനിരക്ക് രേഖപ്പെടുത്തിയതായി ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു, പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന മരണനിരക്ക് 61% മുതൽ 65% വരെയായിരുന്നു. മറ്റൊരു കോമ്പിനേഷൻ, യൂഡെസ്മോൾ പ്ലസ് യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ, 24 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷറിന് ശേഷം 78.66% മരണനിരക്ക് കാണിച്ചു, പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന മരണനിരക്ക് 60% ആയിരുന്നു. മുതിർന്ന ഈഡിസ് ഈജിപ്തിക്കെതിരെ വലിയ തോതിൽ പ്രയോഗിച്ചപ്പോഴും തിരഞ്ഞെടുത്ത മൂന്ന് കോമ്പിനേഷനുകളും സിനർജിസ്റ്റിക് ഫലങ്ങൾ പ്രകടമാക്കി (പട്ടിക 6).
ഈ പഠനത്തിൽ, Mp, As, Os, Em, Cl തുടങ്ങിയ തിരഞ്ഞെടുത്ത സസ്യ EO-കൾ Aedes aegypti യുടെ ലാർവ ഘട്ടങ്ങളിലും മുതിർന്നവരുടെ ഘട്ടങ്ങളിലും മാരകമായ ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു. 0.42 ppm എന്ന LC50 മൂല്യത്തോടെ ഏറ്റവും ഉയർന്ന ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം Mp EO-യ്ക്ക് ഉണ്ടായിരുന്നു, തുടർന്ന് 24 മണിക്കൂറിനുശേഷം 50 ppm-ൽ താഴെയുള്ള LC50 മൂല്യമുള്ള As, Os, Em EO-കൾക്ക്. കൊതുകുകളുടെയും മറ്റ് ഡിപ്റ്ററസ് ഈച്ചകളുടെയും മുൻ പഠനങ്ങളുമായി ഈ ഫലങ്ങൾ പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. Cl-ന്റെ ലാർവിസൈഡൽ ശക്തി മറ്റ് അവശ്യ എണ്ണകളേക്കാൾ കുറവാണെങ്കിലും, 24 മണിക്കൂറിനുശേഷം 163.65 ppm എന്ന LC50 മൂല്യത്തോടെ, 24 മണിക്കൂറിനുശേഷം 23.37 ppm എന്ന LC50 മൂല്യത്തോടെ അതിന്റെ മുതിർന്നവരുടെ സാധ്യത ഏറ്റവും ഉയർന്നതാണ്. Mp, As, Em EO-കൾ 24 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷറിൽ 100–120 ppm പരിധിയിൽ LC50 മൂല്യങ്ങളുള്ള നല്ല അലർജിക്കൽ സാധ്യത കാണിച്ചു, പക്ഷേ അവയുടെ ലാർവിസൈഡൽ ഫലപ്രാപ്തിയേക്കാൾ താരതമ്യേന കുറവായിരുന്നു. മറുവശത്ത്, ഏറ്റവും ഉയർന്ന ചികിത്സാ അളവിൽ പോലും EO Os ഒരു നിസ്സാരമായ അലർജിക്കൽ പ്രഭാവം പ്രകടമാക്കി. അതിനാൽ, കൊതുകുകളുടെ വളർച്ചാ ഘട്ടത്തെ ആശ്രയിച്ച് സസ്യങ്ങൾക്കുള്ള എഥിലീൻ ഓക്സൈഡിന്റെ വിഷാംശം വ്യത്യാസപ്പെടാമെന്ന് ഫലങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. പ്രാണികളുടെ ശരീരത്തിലേക്ക് EO-കളുടെ നുഴഞ്ഞുകയറ്റ നിരക്ക്, നിർദ്ദിഷ്ട ലക്ഷ്യ എൻസൈമുകളുമായുള്ള അവയുടെ ഇടപെടൽ, ഓരോ വികസന ഘട്ടത്തിലും കൊതുകിന്റെ വിഷവിമുക്തമാക്കൽ ശേഷി എന്നിവയെയും ഇത് ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു16. എഥിലീൻ ഓക്സൈഡിന്റെ ജൈവിക പ്രവർത്തനത്തിൽ പ്രധാന ഘടക സംയുക്തം ഒരു പ്രധാന ഘടകമാണെന്ന് ധാരാളം പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്, കാരണം ഇത് മൊത്തം സംയുക്തങ്ങളിൽ ഭൂരിഭാഗവും ഉൾക്കൊള്ളുന്നു3,12,17,18. അതിനാൽ, ഓരോ EO-യിലും രണ്ട് പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ ഞങ്ങൾ പരിഗണിച്ചു. GC-MS ഫലങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡും ഡയലിൽ ട്രൈസൾഫൈഡും EO As ന്റെ പ്രധാന സംയുക്തങ്ങളായി തിരിച്ചറിഞ്ഞു, ഇത് മുൻ റിപ്പോർട്ടുകളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു19,20,21. മുൻ റിപ്പോർട്ടുകൾ മെന്തോൾ അതിന്റെ പ്രധാന സംയുക്തങ്ങളിൽ ഒന്നാണെന്ന് സൂചിപ്പിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിലും, കാർവോൺ, ലിമോണീൻ എന്നിവ വീണ്ടും Mp EO22,23 ന്റെ പ്രധാന സംയുക്തങ്ങളായി തിരിച്ചറിഞ്ഞു. Os EO യുടെ കോമ്പോസിഷൻ പ്രൊഫൈൽ യൂജെനോൾ, മീഥൈൽ യൂജെനോൾ എന്നിവയാണ് പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ എന്ന് കാണിച്ചു, ഇത് മുൻ ഗവേഷകരുടെ കണ്ടെത്തലുകൾക്ക് സമാനമാണ്16,24. Em ലീഫ് ഓയിലിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന പ്രധാന സംയുക്തങ്ങളായി യൂക്കാലിപ്റ്റോളും യൂക്കാലിപ്റ്റോളും റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്, ഇത് ചില ഗവേഷകരുടെ കണ്ടെത്തലുകളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു25,26 എന്നാൽ ഒലാലേഡ് തുടങ്ങിയവരുടെ കണ്ടെത്തലുകൾക്ക് വിരുദ്ധമാണ്27. മെലാലൂക്ക അവശ്യ എണ്ണയിൽ സിനിയോളിന്റെയും α-പിനെനിന്റെയും ആധിപത്യം നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു, ഇത് മുൻ പഠനങ്ങൾക്ക് സമാനമാണ്28,29. വ്യത്യസ്ത സ്ഥലങ്ങളിൽ ഒരേ സസ്യ ഇനങ്ങളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്ന അവശ്യ എണ്ണകളുടെ ഘടനയിലും സാന്ദ്രതയിലും അന്തർലീനമായ വ്യത്യാസങ്ങൾ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്, കൂടാതെ ഈ പഠനത്തിൽ നിരീക്ഷിക്കുകയും ചെയ്തു, ഇവ ഭൂമിശാസ്ത്രപരമായ സസ്യവളർച്ചാ സാഹചര്യങ്ങൾ, വിളവെടുപ്പ് സമയം, വികസന ഘട്ടം അല്ലെങ്കിൽ സസ്യ പ്രായം എന്നിവയാൽ സ്വാധീനിക്കപ്പെടുന്നു. കീമോടൈപ്പുകളുടെ രൂപം മുതലായവ. 22,30,31,32. തിരിച്ചറിഞ്ഞ പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ പിന്നീട് വാങ്ങി അവയുടെ ലാർവിസൈഡൽ ഫലങ്ങളും മുതിർന്ന ഈഡിസ് ഈജിപ്തി കൊതുകുകളിലെ ഫലങ്ങളും പരിശോധിച്ചു. ഡയാലിൽ ഡൈസൾഫൈഡിന്റെ ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം അസംസ്കൃത EO As ന്റെ ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്താവുന്നതാണെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു. എന്നാൽ ഡയാലിൽ ട്രൈസൾഫൈഡിന്റെ പ്രവർത്തനം EO As നേക്കാൾ കൂടുതലാണ്. ഈ ഫലങ്ങൾ ക്യൂലെക്സ് ഫിലിപ്പൈൻസിൽ കിംബാരീസ് തുടങ്ങിയവർ 33 നേടിയതിന് സമാനമാണ്. എന്നിരുന്നാലും, ഈ രണ്ട് സംയുക്തങ്ങളും ലക്ഷ്യ കൊതുകുകൾക്കെതിരെ നല്ല ഓട്ടോസിഡൽ പ്രവർത്തനം കാണിച്ചില്ല, ഇത് ടെനെബ്രിയോ മോളിറ്ററിലെ പ്ലാറ്റ-റൂഡ തുടങ്ങിയവർ 34 ന്റെ ഫലങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. ഏഡിസ് ഈജിപ്തിയുടെ ലാർവ ഘട്ടത്തിനെതിരെ Os EO ഫലപ്രദമാണ്, പക്ഷേ മുതിർന്നവരുടെ ഘട്ടത്തിനെതിരെ അല്ല. പ്രധാന വ്യക്തിഗത സംയുക്തങ്ങളുടെ ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം അസംസ്കൃത Os EO യേക്കാൾ കുറവാണെന്ന് സ്ഥാപിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്. അസംസ്കൃത എഥിലീൻ ഓക്സൈഡിലെ മറ്റ് സംയുക്തങ്ങൾക്കും അവയുടെ ഇടപെടലുകൾക്കും ഇത് ഒരു പങ്കിനെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. മീഥൈൽ യൂജെനോളിന് മാത്രം നിസ്സാരമായ പ്രവർത്തനമേയുള്ളൂ, അതേസമയം യൂജെനോളിന് മാത്രം മിതമായ ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം മാത്രമേയുള്ളൂ. ഒരു വശത്ത്, 35,36 എന്ന പ്രവർത്തനം മാത്രമേ ഉള്ളൂ എന്ന് ഈ നിഗമനം സ്ഥിരീകരിക്കുന്നു, മറുവശത്ത്, മുൻ ഗവേഷകരുടെ നിഗമനങ്ങൾക്ക് വിരുദ്ധമാണ്37,38. യൂജെനോളിന്റെയും മെത്തില്യൂജെനോളിന്റെയും പ്രവർത്തന ഗ്രൂപ്പുകളിലെ വ്യത്യാസങ്ങൾ ഒരേ ലക്ഷ്യ പ്രാണികൾക്ക് വ്യത്യസ്ത വിഷാംശങ്ങൾക്ക് കാരണമായേക്കാം39. ലിമോണീന് മിതമായ ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം ഉണ്ടെന്ന് കണ്ടെത്തി, അതേസമയം കാർവോണിന്റെ പ്രഭാവം നിസ്സാരമായിരുന്നു. അതുപോലെ, മുതിർന്ന പ്രാണികൾക്ക് ലിമോണീന്റെ താരതമ്യേന കുറഞ്ഞ വിഷാംശവും കാർവോണിന്റെ ഉയർന്ന വിഷാംശവും ചില മുൻ പഠനങ്ങളുടെ ഫലങ്ങളെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു40 എന്നാൽ മറ്റുള്ളവയ്ക്ക് വിരുദ്ധമാണ്41. ഇൻട്രാസൈക്ലിക്, എക്സോസൈക്ലിക് സ്ഥാനങ്ങളിൽ ഇരട്ട ബോണ്ടുകളുടെ സാന്നിധ്യം ലാർവിസൈഡുകളായി ഈ സംയുക്തങ്ങളുടെ ഗുണങ്ങൾ വർദ്ധിപ്പിക്കും3,41, അതേസമയം അപൂരിത ആൽഫയും ബീറ്റാ കാർബണുകളും ഉള്ള ഒരു കെറ്റോണായ കാർവോൺ മുതിർന്നവരിൽ വിഷബാധയ്ക്കുള്ള ഉയർന്ന സാധ്യത പ്രകടിപ്പിച്ചേക്കാം42. എന്നിരുന്നാലും, ലിമോണീനിന്റെയും കാർവോണിന്റെയും വ്യക്തിഗത സവിശേഷതകൾ മൊത്തം EO Mp-നേക്കാൾ വളരെ കുറവാണ് (പട്ടിക 1, പട്ടിക 3). പരിശോധിച്ച ടെർപെനോയിഡുകളിൽ, 2.5 ppm-ൽ താഴെയുള്ള LC50 മൂല്യമുള്ള ഏറ്റവും വലിയ ലാർവിസൈഡലും മുതിർന്നവരുടെ പ്രവർത്തനവും യൂഡെസ്‌മോളിനുണ്ടെന്ന് കണ്ടെത്തി, ഇത് ഈഡിസ് കൊതുകുകളുടെ നിയന്ത്രണത്തിന് ഒരു വാഗ്ദാന സംയുക്തമാക്കി മാറ്റുന്നു. ചെങ് തുടങ്ങിയവരുടെ കണ്ടെത്തലുകളുമായി ഇത് പൊരുത്തപ്പെടുന്നില്ലെങ്കിലും, മുഴുവൻ EO Em-നേക്കാളും മികച്ചതാണ് ഇതിന്റെ പ്രകടനം.40. യൂക്കാലിപ്റ്റസ് പോലുള്ള ഓക്സിജൻ അടങ്ങിയ മോണോടെർപീനുകളേക്കാൾ കുറഞ്ഞ അസ്ഥിരതയുള്ള രണ്ട് ഐസോപ്രീൻ യൂണിറ്റുകളുള്ള ഒരു സെസ്ക്വിറ്റെർപീൻ ആണ് യൂഡെസ്‌മോൾ, അതിനാൽ ഒരു കീടനാശിനി എന്ന നിലയിൽ ഇതിന് കൂടുതൽ സാധ്യതയുണ്ട്. യൂക്കാലിപ്റ്റോളിന് ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനത്തേക്കാൾ വലിയ പ്രായപൂർത്തിയായ ജീവികളുടെ പ്രവർത്തനം ഉണ്ട്, കൂടാതെ മുൻകാല പഠനങ്ങളുടെ ഫലങ്ങൾ ഇതിനെ പിന്തുണയ്ക്കുകയും നിരാകരിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു37,43,44. ഈ പ്രവർത്തനം മാത്രം മുഴുവൻ EO Cl യുമായി ഏതാണ്ട് താരതമ്യപ്പെടുത്താവുന്നതാണ്. മറ്റൊരു സൈക്ലിക് മോണോടെർപീൻ, α-പിനെൻ, ലാർവിസൈഡൽ ഫലത്തേക്കാൾ Aedes aegypti യിൽ പ്രായപൂർത്തിയായ ജീവികളുടെ സ്വാധീനം കുറവാണ്, ഇത് പൂർണ്ണ EO Cl ന്റെ ഫലത്തിന് വിപരീതമാണ്. ടെർപെനോയിഡുകളുടെ മൊത്തത്തിലുള്ള കീടനാശിനി പ്രവർത്തനം അവയുടെ ലിപ്പോഫിലിസിറ്റി, അസ്ഥിരത, കാർബൺ ബ്രാഞ്ചിംഗ്, പ്രൊജക്ഷൻ ഏരിയ, ഉപരിതല വിസ്തീർണ്ണം, ഫങ്ഷണൽ ഗ്രൂപ്പുകൾ, അവയുടെ സ്ഥാനങ്ങൾ എന്നിവയാൽ സ്വാധീനിക്കപ്പെടുന്നു. കോശ ശേഖരണം നശിപ്പിക്കുന്നതിലൂടെയും, ശ്വസന പ്രവർത്തനം തടയുന്നതിലൂടെയും, നാഡി പ്രേരണകളുടെ സംക്രമണം തടസ്സപ്പെടുത്തുന്നതിലൂടെയും ഈ സംയുക്തങ്ങൾ പ്രവർത്തിച്ചേക്കാം. 47 ലെക്കിന്റെ ഡാറ്റയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്ന LC50 മൂല്യം 0.43 ppm ഉള്ള സിന്തറ്റിക് ഓർഗാനോഫോസ്ഫേറ്റ് ടെമെഫോസിന് ഏറ്റവും ഉയർന്ന ലാർവിസൈഡൽ പ്രവർത്തനം ഉണ്ടെന്ന് കണ്ടെത്തി -ഉതല48. സിന്തറ്റിക് ഓർഗാനോഫോസ്ഫറസ് മാലത്തിയോണിന്റെ മുതിർന്നവരുടെ പ്രവർത്തനം 5.44 ppm ൽ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടു. ഈ രണ്ട് ഓർഗാനോഫോസ്ഫേറ്റുകളും ഈഡിസ് ഈജിപ്തിയുടെ ലബോറട്ടറി സ്ട്രെയിനുകൾക്കെതിരെ അനുകൂലമായ പ്രതികരണങ്ങൾ കാണിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിലും, ലോകത്തിന്റെ വിവിധ ഭാഗങ്ങളിൽ ഈ സംയുക്തങ്ങളോടുള്ള കൊതുകുകളുടെ പ്രതിരോധം റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്49. എന്നിരുന്നാലും, ഹെർബൽ മരുന്നുകളോടുള്ള പ്രതിരോധം വികസിപ്പിച്ചെടുത്തതിന് സമാനമായ റിപ്പോർട്ടുകളൊന്നും കണ്ടെത്തിയിട്ടില്ല50. അതിനാൽ, വെക്റ്റർ നിയന്ത്രണ പരിപാടികളിൽ രാസ കീടനാശിനികൾക്ക് പകരമായി സസ്യശാസ്ത്രത്തെ കണക്കാക്കുന്നു.
ശക്തിയേറിയ ടെർപെനോയിഡുകളിൽ നിന്നും തൈമെറ്റ്ഫോസിനൊപ്പം ടെർപെനോയിഡുകളിൽ നിന്നും തയ്യാറാക്കിയ 28 ബൈനറി കോമ്പിനേഷനുകളിൽ (1:1) ലാർവിസൈഡൽ പ്രഭാവം പരീക്ഷിച്ചു, 9 കോമ്പിനേഷനുകൾ സിനർജിസ്റ്റിക് ആണെന്നും 14 എണ്ണം ആൻറാജിക് ആണെന്നും 5 എണ്ണം ആൻറാജിക് ആണെന്നും കണ്ടെത്തി. ഫലമില്ല. മറുവശത്ത്, മുതിർന്നവരുടെ പൊട്ടൻസി ബയോഅസെയിൽ, 7 കോമ്പിനേഷനുകൾ സിനർജിസ്റ്റിക് ആണെന്നും 15 എണ്ണം ആൻറാജിക് ആണെന്നും 6 എണ്ണം ഒരു ഫലവുമില്ലെന്നും റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടു. ചില കോമ്പിനേഷനുകൾ സിനർജിസ്റ്റിക് പ്രഭാവം ഉണ്ടാക്കുന്നതിന്റെ കാരണം വ്യത്യസ്ത പ്രധാന പാതകളിൽ ഒരേസമയം ഇടപെടുന്ന കാൻഡിഡേറ്റ് സംയുക്തങ്ങൾ മൂലമോ അല്ലെങ്കിൽ ഒരു പ്രത്യേക ജൈവ പാതയുടെ വ്യത്യസ്ത കീ എൻസൈമുകളുടെ തുടർച്ചയായ തടസ്സം മൂലമോ ആകാം. ഡയാലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, യൂക്കാലിപ്റ്റസ് അല്ലെങ്കിൽ യൂജെനോൾ എന്നിവയുമായുള്ള ലിമോണീന്റെ സംയോജനം ചെറുതും വലുതുമായ രണ്ട് ആപ്ലിക്കേഷനുകളിലും സിനർജിസ്റ്റിക് ആണെന്ന് കണ്ടെത്തി (പട്ടിക 6), അതേസമയം യൂക്കാലിപ്റ്റസ് അല്ലെങ്കിൽ α-പിനെനുമായുള്ള അതിന്റെ സംയോജനം ലാർവകളിൽ വിരുദ്ധ ഫലങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കുന്നതായി കണ്ടെത്തി. ശരാശരി, ലിമോണീൻ ഒരു നല്ല സിനർജിസ്റ്റായി കാണപ്പെടുന്നു, ഒരുപക്ഷേ മീഥൈൽ ഗ്രൂപ്പുകളുടെ സാന്നിധ്യം, സ്ട്രാറ്റം കോർണിയത്തിലേക്ക് നല്ല നുഴഞ്ഞുകയറ്റം, വ്യത്യസ്തമായ പ്രവർത്തന സംവിധാനം എന്നിവ കാരണം. ലിമോണീൻ പ്രാണികളുടെ പുറംതൊലിയിൽ തുളച്ചുകയറുന്നതിലൂടെ (സമ്പർക്ക വിഷാംശം), ദഹനവ്യവസ്ഥയെ ബാധിക്കുന്നതിലൂടെ (ആന്റിഫീഡന്റ്), അല്ലെങ്കിൽ ശ്വസനവ്യവസ്ഥയെ ബാധിക്കുന്നതിലൂടെ (ഫ്യൂമിഗേഷൻ പ്രവർത്തനം) വിഷ ഫലങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കുമെന്ന് മുമ്പ് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്, [54] അതേസമയം യൂജെനോൾ പോലുള്ള ഫിനൈൽപ്രോപനോയിഡുകൾ ഉപാപചയ എൻസൈമുകളെ ബാധിച്ചേക്കാം [55]. അതിനാൽ, വ്യത്യസ്ത പ്രവർത്തന സംവിധാനങ്ങളുള്ള സംയുക്തങ്ങളുടെ സംയോജനം മിശ്രിതത്തിന്റെ മൊത്തത്തിലുള്ള മാരകമായ പ്രഭാവം വർദ്ധിപ്പിക്കും. യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ ഡയാലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, യൂക്കാലിപ്റ്റസ് അല്ലെങ്കിൽ α-പിനെൻ എന്നിവയുമായി സിനർജിസ്റ്റിക് ആണെന്ന് കണ്ടെത്തി, എന്നാൽ മറ്റ് സംയുക്തങ്ങളുമായുള്ള മറ്റ് സംയോജനങ്ങൾ ലാർവിസൈഡൽ അല്ലാത്തതോ വിരുദ്ധമോ ആയിരുന്നു. യൂക്കാലിപ്റ്റോളിന് അസറ്റൈൽകോളിനെസ്റ്ററേസ് (AChE), ഒക്ടാമൈൻ, GABA റിസപ്റ്ററുകൾ എന്നിവയിൽ തടസ്സപ്പെടുത്തുന്ന പ്രവർത്തനം ഉണ്ടെന്ന് ആദ്യകാല പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്56. സൈക്ലിക് മോണോടെർപീനുകൾ, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ, യൂജെനോൾ മുതലായവയ്ക്ക് അവയുടെ ന്യൂറോടോക്സിക് പ്രവർത്തനത്തിന്റെ അതേ പ്രവർത്തന സംവിധാനം ഉണ്ടായിരിക്കാമെന്നതിനാൽ, [57] അതുവഴി പരസ്പര തടസ്സത്തിലൂടെ അവയുടെ സംയോജിത ഫലങ്ങൾ കുറയ്ക്കുന്നു. അതുപോലെ, ഡയാലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, α-പിനെൻ, ലിമോണീൻ എന്നിവയുമായി ടെമെഫോസിന്റെ സംയോജനം സിനർജിസ്റ്റിക് ആണെന്ന് കണ്ടെത്തി, ഇത് ഹെർബൽ ഉൽപ്പന്നങ്ങളും സിന്തറ്റിക് ഓർഗാനോഫോസ്ഫേറ്റുകളും തമ്മിലുള്ള സിനർജിസ്റ്റിക് ഫലത്തെക്കുറിച്ചുള്ള മുൻ റിപ്പോർട്ടുകളെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു58.
ഈഡിസ് ഈജിപ്റ്റിയുടെ ലാർവ ഘട്ടങ്ങളിലും മുതിർന്നവരുടെ ഘട്ടങ്ങളിലും യൂഡെസ്മോളിന്റെയും യൂക്കാലിപ്റ്റോളിന്റെയും സംയോജനം ഒരു സിനർജിസ്റ്റിക് പ്രഭാവം ചെലുത്തുന്നതായി കണ്ടെത്തി, ഒരുപക്ഷേ അവയുടെ വ്യത്യസ്ത രാസഘടനകൾ കാരണം അവയുടെ വ്യത്യസ്ത പ്രവർത്തന രീതികൾ കാരണമാകാം. യൂഡെസ്മോൾ (ഒരു സെസ്ക്വിറ്റെർപീൻ) ശ്വസനവ്യവസ്ഥയെ ബാധിച്ചേക്കാം 59, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ (ഒരു മോണോടെർപീൻ) അസറ്റൈൽകോളിനെസ്റ്ററേസിനെ ബാധിച്ചേക്കാം 60. രണ്ടോ അതിലധികമോ ലക്ഷ്യസ്ഥാനങ്ങളിലേക്ക് ചേരുവകൾ ഒരുമിച്ച് എക്സ്പോഷർ ചെയ്യുന്നത് കോമ്പിനേഷന്റെ മൊത്തത്തിലുള്ള മാരകമായ പ്രഭാവം വർദ്ധിപ്പിക്കും. മുതിർന്നവരുടെ പദാർത്ഥ ബയോഅസെകളിൽ, മാലത്തിയോൺ കാർവോൺ അല്ലെങ്കിൽ യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ അല്ലെങ്കിൽ യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ അല്ലെങ്കിൽ ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ് അല്ലെങ്കിൽ α-പിനെൻ എന്നിവയുമായി സിനർജിസ്റ്റിക് ആണെന്ന് കണ്ടെത്തി, ഇത് ലിമോണീൻ, ഡൈ എന്നിവ ചേർക്കുന്നതിലൂടെ സിനർജിസ്റ്റിക് ആണെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. അലൈൽ ട്രൈസൽഫൈഡ് ഒഴികെ, ടെർപീൻ സംയുക്തങ്ങളുടെ മുഴുവൻ പോർട്ട്‌ഫോളിയോയ്ക്കും നല്ല സിനർജിസ്റ്റിക് അലർസൈഡ് സ്ഥാനാർത്ഥികൾ. തങ്കം, കതിരേസൻ61 എന്നിവർ ഹെർബൽ എക്സ്ട്രാക്റ്റുകളുമായുള്ള മാലത്തിയോണിന്റെ സിനർജിസ്റ്റിക് ഫലത്തിന്റെ സമാനമായ ഫലങ്ങൾ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. മാലത്തിയോൺ, ഫൈറ്റോകെമിക്കലുകളുടെ സംയോജിത വിഷാംശം പ്രാണികളെ വിഷവിമുക്തമാക്കുന്ന എൻസൈമുകളിലെ സ്വാധീനം മൂലമാകാം ഈ സിനർജിസ്റ്റിക് പ്രതികരണം. മാലത്തിയോൺ പോലുള്ള ഓർഗാനോഫോസ്ഫേറ്റുകൾ സാധാരണയായി സൈറ്റോക്രോം പി 450 എസ്റ്റെറേസുകളെയും മോണോഓക്സിജനേസുകളെയും 62,63,64 തടയുന്നതിലൂടെ പ്രവർത്തിക്കുന്നു. അതിനാൽ, മാലത്തിയോൺ ഈ പ്രവർത്തന സംവിധാനങ്ങളുമായും ടെർപീനുകൾ വ്യത്യസ്ത പ്രവർത്തന സംവിധാനങ്ങളുമായും സംയോജിപ്പിക്കുന്നത് കൊതുകുകളിൽ മൊത്തത്തിലുള്ള മാരകമായ പ്രഭാവം വർദ്ധിപ്പിക്കും.
മറുവശത്ത്, തിരഞ്ഞെടുത്ത സംയുക്തങ്ങൾ ഓരോ സംയുക്തത്തേക്കാളും സംയോജനത്തിൽ കുറഞ്ഞ സജീവമാണെന്ന് വൈരുദ്ധ്യം സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ചില സംയോജനങ്ങളിൽ വൈരുദ്ധ്യത്തിനുള്ള കാരണം, ഒരു സംയുക്തം ആഗിരണം, വിതരണം, ഉപാപചയം അല്ലെങ്കിൽ വിസർജ്ജനം എന്നിവയുടെ നിരക്ക് മാറ്റിക്കൊണ്ട് മറ്റൊരു സംയുക്തത്തിന്റെ സ്വഭാവത്തെ പരിഷ്കരിക്കുന്നു എന്നതാണ്. ആദ്യകാല ഗവേഷകർ ഇത് മയക്കുമരുന്ന് സംയോജനങ്ങളിലെ വൈരുദ്ധ്യത്തിന്റെ കാരണമായി കണക്കാക്കി. തന്മാത്രകൾ സാധ്യമായ സംവിധാനം 65. അതുപോലെ, വൈരുദ്ധ്യത്തിന്റെ സാധ്യമായ കാരണങ്ങൾ സമാനമായ പ്രവർത്തന സംവിധാനങ്ങളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കാം, ഒരേ റിസപ്റ്ററിനോ ലക്ഷ്യ സൈറ്റിനോ വേണ്ടിയുള്ള ഘടക സംയുക്തങ്ങളുടെ മത്സരം. ചില സന്ദർഭങ്ങളിൽ, ലക്ഷ്യ പ്രോട്ടീന്റെ മത്സരാധിഷ്ഠിതമല്ലാത്ത തടസ്സവും സംഭവിക്കാം. ഈ പഠനത്തിൽ, രണ്ട് ഓർഗാനോസൾഫർ സംയുക്തങ്ങൾ, ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, ഡയലിൽ ട്രൈസൾഫൈഡ്, വിരുദ്ധ ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു, ഒരുപക്ഷേ ഒരേ ലക്ഷ്യ സൈറ്റിനായുള്ള മത്സരം മൂലമാകാം. അതുപോലെ, ഈ രണ്ട് സൾഫർ സംയുക്തങ്ങളും വിരുദ്ധ ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു, യൂഡ്‌സ്മോൾ, α-പിനെൻ എന്നിവയുമായി സംയോജിപ്പിക്കുമ്പോൾ യാതൊരു ഫലവും ഉണ്ടായില്ല. യൂഡ്‌സ്മോൾ, ആൽഫ-പിനെൻ എന്നിവ ചാക്രിക സ്വഭാവമുള്ളവയാണ്, അതേസമയം ഡയലിൽ ഡൈസൾഫൈഡ്, ഡയലിൽ ട്രൈസൾഫൈഡ് എന്നിവ ആലിഫാറ്റിക് സ്വഭാവമുള്ളവയാണ്. രാസഘടനയെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, ഈ സംയുക്തങ്ങളുടെ സംയോജനം മൊത്തത്തിലുള്ള മാരകമായ പ്രവർത്തനം വർദ്ധിപ്പിക്കണം, കാരണം അവയുടെ ലക്ഷ്യ സ്ഥലങ്ങൾ സാധാരണയായി വ്യത്യസ്തമാണ്34,47, എന്നാൽ പരീക്ഷണാത്മകമായി ഞങ്ങൾ വൈരാഗ്യം കണ്ടെത്തി, ഇത് ഇൻ വിവോയിലെ ചില അജ്ഞാത ജീവികളിൽ ഈ സംയുക്തങ്ങളുടെ പങ്ക് മൂലമാകാം. പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിന്റെ ഫലമായി സിസ്റ്റങ്ങൾ. അതുപോലെ, സിനിയോളിന്റെയും α-പിനെനിന്റെയും സംയോജനം വിരുദ്ധ പ്രതികരണങ്ങൾ സൃഷ്ടിച്ചു, എന്നിരുന്നാലും രണ്ട് സംയുക്തങ്ങൾക്കും വ്യത്യസ്ത പ്രവർത്തന ലക്ഷ്യങ്ങളുണ്ടെന്ന് ഗവേഷകർ മുമ്പ് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തിരുന്നു47,60. രണ്ട് സംയുക്തങ്ങളും ചാക്രിക മോണോടെർപീനുകളായതിനാൽ, ബൈൻഡിംഗിനായി മത്സരിക്കുകയും പഠിച്ച കോമ്പിനേറ്റോറിയൽ ജോഡികളുടെ മൊത്തത്തിലുള്ള വിഷാംശത്തെ സ്വാധീനിക്കുകയും ചെയ്യുന്ന ചില പൊതു ലക്ഷ്യ സൈറ്റുകൾ ഉണ്ടാകാം.
LC50 മൂല്യങ്ങളുടെയും നിരീക്ഷിച്ച മരണനിരക്കിന്റെയും അടിസ്ഥാനത്തിൽ, ഏറ്റവും മികച്ച രണ്ട് സിനർജിസ്റ്റിക് ടെർപീൻ കോമ്പിനേഷനുകൾ തിരഞ്ഞെടുത്തു, അതായത് കാർവോൺ + ലിമോണീൻ, യൂക്കാലിപ്റ്റോൾ + യൂഡെസ്‌മോൾ ജോഡികൾ, അതുപോലെ ടെർപീനുകളുമായുള്ള സിന്തറ്റിക് ഓർഗാനോഫോസ്ഫറസ് മാലത്തിയോൺ. മുതിർന്നവരുടെ ഒരു കീടനാശിനി ബയോഅസ്സേയിൽ മാലത്തിയോൺ + യൂഡെസ്‌മോൾ സംയുക്തങ്ങളുടെ ഒപ്റ്റിമൽ സിനർജിസ്റ്റിക് സംയോജനം പരീക്ഷിച്ചു. താരതമ്യേന വലിയ എക്സ്പോഷർ ഇടങ്ങളിൽ വലിയ എണ്ണം വ്യക്തികൾക്കെതിരെ ഈ ഫലപ്രദമായ കോമ്പിനേഷനുകൾ പ്രവർത്തിക്കുമോ എന്ന് സ്ഥിരീകരിക്കാൻ വലിയ പ്രാണികളുടെ കോളനികളെ ലക്ഷ്യം വയ്ക്കുക. ഈ കോമ്പിനേഷനുകളെല്ലാം പ്രാണികളുടെ വലിയ കൂട്ടങ്ങൾക്കെതിരെ ഒരു സിനർജിസ്റ്റിക് പ്രഭാവം പ്രകടമാക്കുന്നു. ഈഡിസ് ഈജിപ്തി ലാർവകളുടെ വലിയ ജനസംഖ്യയ്‌ക്കെതിരെ പരീക്ഷിച്ച ഒപ്റ്റിമൽ സിനർജിസ്റ്റിക് ലാർവിസിഡൽ കോമ്പിനേഷന് സമാനമായ ഫലങ്ങൾ ലഭിച്ചു. അതിനാൽ, സസ്യ EO സംയുക്തങ്ങളുടെ ഫലപ്രദമായ സിനർജിസ്റ്റിക് ലാർവിസിഡൽ, അഡൽറ്റിസിഡൽ കോമ്പിനേഷൻ നിലവിലുള്ള സിനർജിസ്റ്റിക് കെമിക്കലുകൾക്കെതിരെ ശക്തമായ ഒരു സ്ഥാനാർത്ഥിയാണെന്നും അഡൽറ്റിസിഡൽ കോമ്പിനേഷൻ ഈഡിസ് ഈജിപ്തി ജനസംഖ്യയെ നിയന്ത്രിക്കാൻ കൂടുതൽ ഉപയോഗിക്കാമെന്നും പറയാം. അതുപോലെ, കൊതുകുകൾക്ക് നൽകുന്ന തൈമെറ്റ്ഫോസ് അല്ലെങ്കിൽ മാലത്തിയോൺ എന്നിവയുടെ അളവ് കുറയ്ക്കുന്നതിന് സിന്തറ്റിക് ലാർവിസിഡുകളുടെയോ അഡൽറ്റിസിഡുകളുടെയോ ഫലപ്രദമായ കോമ്പിനേഷനുകൾ ഉപയോഗിക്കാം. ഈഡിസ് കൊതുകുകളിലെ ഔഷധ പ്രതിരോധത്തിന്റെ പരിണാമത്തെക്കുറിച്ചുള്ള ഭാവി പഠനങ്ങൾക്ക് ഈ ശക്തമായ സിനർജിസ്റ്റിക് കോമ്പിനേഷനുകൾ പരിഹാരങ്ങൾ നൽകിയേക്കാം.
ഇന്ത്യൻ കൗൺസിൽ ഓഫ് മെഡിക്കൽ റിസർച്ചിലെ ദിബ്രുഗഡിലെ റീജിയണൽ മെഡിക്കൽ റിസർച്ച് സെന്ററിൽ നിന്ന് ഈഡിസ് ഈജിപ്തിയുടെ മുട്ടകൾ ശേഖരിച്ച്, ഗുവാഹത്തി സർവകലാശാലയിലെ സുവോളജി വകുപ്പിൽ നിയന്ത്രിത താപനിലയിലും (28 ± 1 °C) ഈർപ്പത്തിലും (85 ± 5%) ഇനിപ്പറയുന്ന വ്യവസ്ഥകളിൽ സൂക്ഷിച്ചു: അരിവോലി തുടങ്ങിയവയെക്കുറിച്ച് വിവരിച്ചു. വിരിഞ്ഞതിനുശേഷം, ലാർവകൾക്ക് ലാർവ ഭക്ഷണം (നായ ബിസ്‌ക്കറ്റ് പൊടിയും യീസ്റ്റും 3:1 അനുപാതത്തിൽ) നൽകുകയും മുതിർന്നവയ്ക്ക് 10% ഗ്ലൂക്കോസ് ലായനി നൽകുകയും ചെയ്തു. പ്രത്യക്ഷപ്പെട്ടതിന് ശേഷമുള്ള മൂന്നാം ദിവസം മുതൽ, മുതിർന്ന പെൺ കൊതുകുകൾക്ക് ആൽബിനോ എലികളുടെ രക്തം കുടിക്കാൻ അനുവാദമുണ്ടായിരുന്നു. ഫിൽട്ടർ പേപ്പർ ഒരു ഗ്ലാസിൽ വെള്ളത്തിൽ മുക്കി മുട്ടയിടുന്ന കൂട്ടിൽ വയ്ക്കുക.
യൂക്കാലിപ്റ്റസ് ഇലകൾ (മർട്ടേസി), ഹോളി ബേസിൽ (ലാമിയേസി), പുതിന (ലാമിയേസി), മെലാലൂക്ക (മർട്ടേസി), അല്ലിയം ബൾബുകൾ (അമറില്ലിഡേസി) എന്നിങ്ങനെ തിരഞ്ഞെടുത്ത സസ്യ സാമ്പിളുകൾ. ഗുവാഹത്തിയിൽ നിന്ന് ശേഖരിച്ച് ഗുവാഹത്തി സർവകലാശാലയിലെ സസ്യശാസ്ത്ര വിഭാഗം തിരിച്ചറിഞ്ഞു. ശേഖരിച്ച സസ്യ സാമ്പിളുകൾ (500 ഗ്രാം) ഒരു ക്ലെവെഞ്ചർ ഉപകരണം ഉപയോഗിച്ച് 6 മണിക്കൂർ ഹൈഡ്രോഡിസ്റ്റിലേഷന് വിധേയമാക്കി. വേർതിരിച്ചെടുത്ത EO വൃത്തിയുള്ള ഗ്ലാസ് കുപ്പികളിൽ ശേഖരിച്ച് കൂടുതൽ പഠനത്തിനായി 4°C ൽ സൂക്ഷിച്ചു.
ലോകാരോഗ്യ സംഘടനയുടെ സ്റ്റാൻഡേർഡ് നടപടിക്രമങ്ങൾ 67 ചെറുതായി പരിഷ്കരിച്ചതിലൂടെയാണ് ലാർവിസൈഡൽ വിഷാംശം പഠിച്ചത്. ഒരു എമൽസിഫയറായി DMSO ഉപയോഗിക്കുക. ഓരോ EO സാന്ദ്രതയും തുടക്കത്തിൽ 100, 1000 ppm എന്നിവയിൽ പരീക്ഷിച്ചു, ഓരോ പകർപ്പിലും 20 ലാർവകളെ തുറന്നുകാട്ടി. ഫലങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, ഒരു സാന്ദ്രത ശ്രേണി പ്രയോഗിക്കുകയും 1 മണിക്കൂർ മുതൽ 6 മണിക്കൂർ വരെയും (1 മണിക്കൂർ ഇടവേളകളിൽ), ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം 24 മണിക്കൂർ, 48 മണിക്കൂർ, 72 മണിക്കൂർ എന്നിവയിലും മരണനിരക്ക് രേഖപ്പെടുത്തുകയും ചെയ്തു. 24, 48, 72 മണിക്കൂർ എക്സ്പോഷറിന് ശേഷം സബ്ലെത്തൽ സാന്ദ്രതകൾ (LC50) നിർണ്ണയിക്കപ്പെട്ടു. ഓരോ സാന്ദ്രതയും ഒരു നെഗറ്റീവ് നിയന്ത്രണത്തോടൊപ്പം (വെള്ളം മാത്രം) ഒരു പോസിറ്റീവ് നിയന്ത്രണവും (DMSO- ചികിത്സിച്ച വെള്ളം) മൂന്നിരട്ടിയായി പരിശോധിച്ചു. പ്യൂപ്പേഷൻ സംഭവിക്കുകയും നിയന്ത്രണ ഗ്രൂപ്പിലെ ലാർവകളിൽ 10% ൽ കൂടുതൽ മരിക്കുകയും ചെയ്താൽ, പരീക്ഷണം ആവർത്തിക്കുന്നു. നിയന്ത്രണ ഗ്രൂപ്പിലെ മരണനിരക്ക് 5-10% നും ഇടയിലാണെങ്കിൽ, അബോട്ട് തിരുത്തൽ ഫോർമുല 68 ഉപയോഗിക്കുക.
രാമർ തുടങ്ങിയവർ വിവരിച്ച രീതി, അസെറ്റോൺ ഒരു ലായകമായി ഉപയോഗിച്ച് ഈഡിസ് ഈജിപ്തിക്കെതിരെ മുതിർന്നവരുടെ ബയോഅസ്സേയ്ക്കായി ഉപയോഗിച്ചു. ഓരോ EO-യും തുടക്കത്തിൽ 100, 1000 ppm സാന്ദ്രതയിൽ മുതിർന്ന ഈഡിസ് ഈജിപ്തി കൊതുകുകൾക്കെതിരെ പരീക്ഷിച്ചു. തയ്യാറാക്കിയ ഓരോ ലായനിയുടെയും 2 മില്ലി വാട്ട്മാൻ നമ്പറിൽ പുരട്ടുക. 1 ഫിൽട്ടർ പേപ്പർ (വലുപ്പം 12 x 15 cm2) അസെറ്റോൺ 10 മിനിറ്റ് ബാഷ്പീകരിക്കാൻ അനുവദിക്കുക. 2 മില്ലി അസെറ്റോൺ മാത്രം ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച ഫിൽട്ടർ പേപ്പർ ഒരു നിയന്ത്രണമായി ഉപയോഗിച്ചു. അസെറ്റോൺ ബാഷ്പീകരിക്കപ്പെട്ട ശേഷം, ചികിത്സിച്ച ഫിൽട്ടർ പേപ്പറും നിയന്ത്രണ ഫിൽട്ടർ പേപ്പറും ഒരു സിലിണ്ടർ ട്യൂബിൽ (10 സെ.മീ. ആഴത്തിൽ) സ്ഥാപിക്കുന്നു. 3 മുതൽ 4 ദിവസം വരെ പ്രായമുള്ള പത്ത് രക്തം പോറ്റാത്ത കൊതുകുകളെ ഓരോ സാന്ദ്രതയുടെയും ട്രിപ്പിളുകളിലേക്ക് മാറ്റി. പ്രാഥമിക പരിശോധനകളുടെ ഫലങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, തിരഞ്ഞെടുത്ത എണ്ണകളുടെ വിവിധ സാന്ദ്രതകൾ പരീക്ഷിച്ചു. കൊതുക് പുറത്തു വന്നതിന് ശേഷം 1 മണിക്കൂർ, 2 മണിക്കൂർ, 3 മണിക്കൂർ, 4 മണിക്കൂർ, 5 മണിക്കൂർ, 6 മണിക്കൂർ, 24 മണിക്കൂർ, 48 മണിക്കൂർ, 72 മണിക്കൂർ എന്നിങ്ങനെയാണ് മരണനിരക്ക് രേഖപ്പെടുത്തിയത്. 24 മണിക്കൂർ, 48 മണിക്കൂർ, 72 മണിക്കൂർ എന്നിങ്ങനെയുള്ള എക്സ്പോഷർ സമയങ്ങൾക്ക് LC50 മൂല്യങ്ങൾ കണക്കാക്കുക. നിയന്ത്രണ ലോട്ടിന്റെ മരണനിരക്ക് 20% കവിയുന്നുവെങ്കിൽ, മുഴുവൻ പരിശോധനയും ആവർത്തിക്കുക. അതുപോലെ, നിയന്ത്രണ ഗ്രൂപ്പിലെ മരണനിരക്ക് 5% ൽ കൂടുതലാണെങ്കിൽ, അബോട്ടിന്റെ ഫോർമുല 68 ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച സാമ്പിളുകൾക്കുള്ള ഫലങ്ങൾ ക്രമീകരിക്കുക.
തിരഞ്ഞെടുത്ത അവശ്യ എണ്ണകളുടെ ഘടക സംയുക്തങ്ങൾ വിശകലനം ചെയ്യുന്നതിനായി ഗ്യാസ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (എജിലന്റ് 7890A), മാസ് സ്പെക്ട്രോമെട്രി (Accu TOF GCv, ജിയോൾ) എന്നിവ നടത്തി. GC-യിൽ ഒരു FID ഡിറ്റക്ടറും ഒരു കാപ്പിലറി കോളവും (HP5-MS) സജ്ജീകരിച്ചിരുന്നു. കാരിയർ വാതകം ഹീലിയം ആയിരുന്നു, ഫ്ലോ റേറ്റ് 1 മില്ലി/മിനിറ്റ് ആയിരുന്നു. ജിസി പ്രോഗ്രാം അല്ലിയം സാറ്റിവത്തെ 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M ആയും ഒസിമം സെയിന്റമിനെ 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280 ആയും, മിന്റ് 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280 ആയും, യൂക്കാലിപ്റ്റസിന് 20.60-1M-10-200-3M-30-280 ആയും, ചുവപ്പിന് ആയിരം പാളികൾക്ക് അവ 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M ആയും സജ്ജമാക്കുന്നു.
ജിസി ക്രോമാറ്റോഗ്രാം, മാസ് സ്പെക്ട്രോമെട്രി ഫലങ്ങൾ (എൻഐഎസ്ടി 70 സ്റ്റാൻഡേർഡ് ഡാറ്റാബേസിൽ നിന്ന് പരാമർശിച്ചിരിക്കുന്നു) എന്നിവയിൽ നിന്ന് കണക്കാക്കിയ വിസ്തീർണ്ണ ശതമാനത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയാണ് ഓരോ ഇഒയുടെയും പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ തിരിച്ചറിഞ്ഞത്.
ഓരോ EO-യിലെയും രണ്ട് പ്രധാന സംയുക്തങ്ങൾ GC-MS ഫലങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി തിരഞ്ഞെടുത്തു, കൂടുതൽ ബയോഅസെകൾക്കായി 98–99% പരിശുദ്ധിയോടെ സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ചിൽ നിന്ന് വാങ്ങി. മുകളിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ, ഈ സംയുക്തങ്ങൾ ഈഡിസ് ഈജിപ്തിക്കെതിരെ ലാർവിസൈഡലിനും മുതിർന്നവർക്കുള്ള ഫലപ്രാപ്തിക്കും വേണ്ടി പരീക്ഷിച്ചു. ഏറ്റവും സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്ന സിന്തറ്റിക് ലാർവിസൈഡുകൾ ടാമെഫോസേറ്റ് (സിഗ്മ ആൽഡ്രിച്ച്), മുതിർന്നവർക്കുള്ള മരുന്ന് മാലത്തിയോൺ (സിഗ്മ ആൽഡ്രിച്ച്) എന്നിവ തിരഞ്ഞെടുത്ത EO സംയുക്തങ്ങളുമായി അവയുടെ ഫലപ്രാപ്തി താരതമ്യം ചെയ്യാൻ വിശകലനം ചെയ്തു, അതേ നടപടിക്രമം പിന്തുടർന്ന്.
തിരഞ്ഞെടുത്ത ടെർപീൻ സംയുക്തങ്ങളുടെയും ടെർപീൻ സംയുക്തങ്ങളുടെയും വാണിജ്യ ഓർഗാനോഫോസ്ഫേറ്റുകളുടെയും (ടൈൽഫോസ്, മാലത്തിയോൺ) ബൈനറി മിശ്രിതങ്ങൾ, ഓരോ കാൻഡിഡേറ്റ് സംയുക്തത്തിന്റെയും LC50 ഡോസ് 1:1 അനുപാതത്തിൽ കലർത്തിയാണ് തയ്യാറാക്കിയ കോമ്പിനേഷനുകൾ തയ്യാറാക്കിയത്. മുകളിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ, ഈഡിസ് ഈജിപ്തിയുടെ ലാർവ, മുതിർന്ന ഘട്ടങ്ങളിൽ തയ്യാറാക്കിയ കോമ്പിനേഷനുകൾ പരീക്ഷിച്ചു. ഓരോ കോമ്പിനേഷനും മൂന്ന് തവണയും ഓരോ കോമ്പിനേഷനിലും അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന വ്യക്തിഗത സംയുക്തങ്ങൾക്ക് മൂന്ന് തവണയും ഓരോ ബയോഅസ്സേ നടത്തി. ലക്ഷ്യ പ്രാണികളുടെ മരണം 24 മണിക്കൂറിനുശേഷം രേഖപ്പെടുത്തി. ഇനിപ്പറയുന്ന ഫോർമുല ഉപയോഗിച്ച് ഒരു ബൈനറി മിശ്രിതത്തിന് പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന മരണനിരക്ക് കണക്കാക്കുക.
ഇവിടെ E = ഒരു ബൈനറി കോമ്പിനേഷനോടുള്ള പ്രതികരണമായി ഈഡിസ് ഈജിപ്തി കൊതുകുകളുടെ പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന മരണനിരക്ക്, അതായത് കണക്ഷൻ (A + B).
പാവ്‌ല52 വിവരിച്ച രീതി ഉപയോഗിച്ച് കണക്കാക്കിയ χ2 മൂല്യത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, ഓരോ ബൈനറി മിശ്രിതത്തിന്റെയും പ്രഭാവം സിനർജിസ്റ്റിക്, ആൻറാഗോണിസ്റ്റിക് അല്ലെങ്കിൽ നോ ഇഫക്റ്റ് എന്ന് ലേബൽ ചെയ്‌തു. ഇനിപ്പറയുന്ന ഫോർമുല ഉപയോഗിച്ച് ഓരോ കോമ്പിനേഷനും χ2 മൂല്യം കണക്കാക്കുക.
കണക്കാക്കിയ χ2 മൂല്യം അനുബന്ധ ഫ്രീഡം ഡിഗ്രികളുടെ പട്ടിക മൂല്യത്തേക്കാൾ കൂടുതലാണെങ്കിൽ (95% കോൺഫിഡൻസ് ഇന്റർവെൽ), നിരീക്ഷിച്ച മരണനിരക്ക് പ്രതീക്ഷിച്ച മരണനിരക്കിനെ കവിയുന്നുവെന്ന് കണ്ടെത്തിയാൽ, ഒരു കോമ്പിനേഷന്റെ പ്രഭാവം സിനർജിസ്റ്റിക് ആയി നിർവചിക്കപ്പെടുന്നു. അതുപോലെ, ഏതെങ്കിലും കോമ്പിനേഷനിലെ കണക്കാക്കിയ χ2 മൂല്യം ചില ഫ്രീഡം ഡിഗ്രികളുള്ള പട്ടിക മൂല്യത്തേക്കാൾ കൂടുതലാണെങ്കിൽ, പക്ഷേ നിരീക്ഷിച്ച മരണനിരക്ക് പ്രതീക്ഷിച്ച മരണനിരക്കിനേക്കാൾ കുറവാണെങ്കിൽ, ചികിത്സ വിരുദ്ധമായി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. ഏതെങ്കിലും കോമ്പിനേഷനിൽ χ2 ന്റെ കണക്കാക്കിയ മൂല്യം അനുബന്ധ ഫ്രീഡം ഡിഗ്രികളിലെ പട്ടിക മൂല്യത്തേക്കാൾ കുറവാണെങ്കിൽ, കോമ്പിനേഷന് ഒരു ഫലവുമില്ലെന്ന് കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു.
മൂന്നോ നാലോ സാധ്യതയുള്ള സിനർജിസ്റ്റിക് കോമ്പിനേഷനുകൾ (100 ലാർവകളും 50 ലാർവിസിഡൽ, മുതിർന്ന പ്രാണികളുടെ പ്രവർത്തനം) ധാരാളം പ്രാണികൾക്കെതിരെ പരീക്ഷിക്കുന്നതിനായി തിരഞ്ഞെടുത്തു. മുതിർന്നവർ) മുകളിൽ പറഞ്ഞതുപോലെ തുടരുക. മിശ്രിതങ്ങൾക്കൊപ്പം, തിരഞ്ഞെടുത്ത മിശ്രിതങ്ങളിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന വ്യക്തിഗത സംയുക്തങ്ങളും തുല്യ എണ്ണം ഈഡിസ് ഈജിപ്തി ലാർവകളിലും മുതിർന്നവരിലും പരീക്ഷിച്ചു. ഒരു കാൻഡിഡേറ്റ് സംയുക്തത്തിന്റെ ഒരു ഭാഗം LC50 ഡോസും മറ്റൊരു ഘടക സംയുക്തത്തിന്റെ ഒരു ഭാഗം LC50 ഡോസും ആണ് കോമ്പിനേഷൻ അനുപാതം. മുതിർന്നവരുടെ പ്രവർത്തന ബയോഅസെയിൽ, തിരഞ്ഞെടുത്ത സംയുക്തങ്ങൾ ലായക അസെറ്റോണിൽ ലയിപ്പിച്ച് 1300 cm3 സിലിണ്ടർ പ്ലാസ്റ്റിക് പാത്രത്തിൽ പൊതിഞ്ഞ ഫിൽട്ടർ പേപ്പറിൽ പ്രയോഗിച്ചു. അസെറ്റോൺ 10 മിനിറ്റ് ബാഷ്പീകരിക്കപ്പെടുകയും മുതിർന്നവ പുറത്തുവിടുകയും ചെയ്തു. അതുപോലെ, ലാർവിസിഡൽ ബയോഅസെയിൽ, LC50 കാൻഡിഡേറ്റ് സംയുക്തങ്ങളുടെ ഡോസുകൾ ആദ്യം തുല്യ അളവിലുള്ള DMSO-യിൽ ലയിപ്പിച്ച് 1300 സിസി പ്ലാസ്റ്റിക് പാത്രങ്ങളിൽ സൂക്ഷിച്ചിരിക്കുന്ന 1 ലിറ്റർ വെള്ളത്തിൽ കലർത്തി, ലാർവകളെ പുറത്തുവിടുന്നു.
LC50 മൂല്യങ്ങൾ കണക്കാക്കുന്നതിനായി SPSS (പതിപ്പ് 16), Minitab സോഫ്റ്റ്‌വെയർ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് രേഖപ്പെടുത്തിയ 71 മരണനിരക്ക് ഡാറ്റയുടെ സാധ്യതാ വിശകലനം നടത്തി.