ജാപ്പനീസ് ഹണിസക്കിളിലെ നെഗറ്റീവ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ റെഗുലേറ്ററായ SlMYB അടിച്ചമർത്തുന്നതിലൂടെ പാക്ലോബുട്രാസോൾ ട്രൈറ്റെർപെനോയിഡ് ബയോസിന്തസിസ് ഉണ്ടാക്കുന്നു.

വലിയ കൂണുകളിൽ ജൈവശാസ്ത്രപരമായി സജീവമായ മെറ്റബോളിറ്റുകളുടെ സമ്പന്നവും വൈവിധ്യപൂർണ്ണവുമായ ഒരു കൂട്ടം അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, അവ വിലപ്പെട്ട ജൈവസ്രോതസ്സുകളായി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. ഫെല്ലിനസ് ഇഗ്നിയേറിയസ് പരമ്പരാഗതമായി ഔഷധ ആവശ്യങ്ങൾക്കും ഭക്ഷ്യ ആവശ്യങ്ങൾക്കും ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു വലിയ കൂൺ ആണ്, എന്നാൽ അതിന്റെ വർഗ്ഗീകരണവും ലാറ്റിൻ നാമവും ഇപ്പോഴും വിവാദമായി തുടരുന്നു. മൾട്ടിജീൻ സെഗ്മെന്റ് അലൈൻമെന്റ് വിശകലനം ഉപയോഗിച്ച്, ഗവേഷകർ ഫെല്ലിനസ് ഇഗ്നിയേറിയസും സമാനമായ ഇനങ്ങളും ഒരു പുതിയ ജനുസ്സിൽ പെട്ടതാണെന്ന് സ്ഥിരീകരിച്ച് സാങ്‌ഹുവാങ്‌പോറസ് ജനുസ് സ്ഥാപിച്ചു. ഹണിസക്കിൾ കൂൺ സാങ്‌ഹുവാങ്‌പോറസ് ലോണിസെറിക്കോള ലോകമെമ്പാടുമുള്ള തിരിച്ചറിഞ്ഞ സാങ്‌ഹുവാങ്‌പോറസ് ഇനങ്ങളിൽ ഒന്നാണ്. പോളിസാക്രറൈഡുകൾ, പോളിഫെനോളുകൾ, ടെർപീനുകൾ, ഫ്ലേവനോയ്ഡുകൾ എന്നിവയുൾപ്പെടെ വൈവിധ്യമാർന്ന ഔഷധ ഗുണങ്ങൾ കാരണം ഫെല്ലിനസ് ഇഗ്നിയേറിയസ് ഗണ്യമായ ശ്രദ്ധ ആകർഷിച്ചു. ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ്, ആൻറി ബാക്ടീരിയൽ, ആന്റിട്യൂമർ പ്രവർത്തനങ്ങൾ പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ഈ ജനുസ്സിലെ പ്രധാന ഔഷധശാസ്ത്രപരമായി സജീവമായ സംയുക്തങ്ങളാണ് ട്രൈറ്റർപീനുകൾ.
വാണിജ്യാടിസ്ഥാനത്തിൽ ട്രൈറ്റെർപെനോയിഡുകൾക്ക് വലിയ സാധ്യതകളുണ്ട്. പ്രകൃതിയിൽ കാട്ടു സാങ്‌ഹുവാങ്‌പോറസ് വിഭവങ്ങളുടെ അപൂർവത കാരണം, അതിന്റെ ബയോസിന്തറ്റിക് കാര്യക്ഷമതയും വിളവും ഫലപ്രദമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നത് നിർണായക പ്രാധാന്യമുള്ളതാണ്. നിലവിൽ, വെള്ളത്തിൽ മുങ്ങിയ ഫെർമെന്റേഷൻ തന്ത്രങ്ങൾ നിയന്ത്രിക്കാൻ കെമിക്കൽ ഇൻഡ്യൂസറുകൾ ഉപയോഗിച്ച് സാങ്‌ഹുവാങ്‌പോറസിന്റെ വിവിധ ദ്വിതീയ മെറ്റബോളിറ്റുകളുടെ ഉത്പാദനം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിൽ പുരോഗതി കൈവരിച്ചിട്ടുണ്ട്. ഉദാഹരണത്തിന്, പോളിഅൺസാച്ചുറേറ്റഡ് ഫാറ്റി ആസിഡുകൾ, ഫംഗസ് എലിസിറ്ററുകൾ11, ഫൈറ്റോഹോർമോണുകൾ (മീഥൈൽ ജാസ്മോണേറ്റ്, സാലിസിലിക് ആസിഡ്14 എന്നിവയുൾപ്പെടെ) സാങ്‌ഹുവാങ്‌പോറസിൽ ട്രൈറ്റെർപെനോയിഡ് ഉത്പാദനം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതായി കാണിച്ചിരിക്കുന്നു. സസ്യവളർച്ചാ നിയന്ത്രണ ഉപകരണങ്ങൾ(പിജിആറുകൾ)സസ്യങ്ങളിലെ ദ്വിതീയ മെറ്റബോളിറ്റുകളുടെ ബയോസിന്തസിസ് നിയന്ത്രിക്കാൻ കഴിയും. ഈ പഠനത്തിൽ, സസ്യവളർച്ച, വിളവ്, ഗുണനിലവാരം, ശാരീരിക സവിശേഷതകൾ എന്നിവ നിയന്ത്രിക്കാൻ വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന സസ്യവളർച്ചാ റെഗുലേറ്ററായ PBZ അന്വേഷിച്ചു. പ്രത്യേകിച്ച്, PBZ ന്റെ ഉപയോഗം സസ്യങ്ങളിലെ ടെർപെനോയിഡ് ബയോസിന്തറ്റിക് പാതയെ സ്വാധീനിക്കും. ഗിബ്ബെറെല്ലിനുകൾ PBZ യുമായി സംയോജിപ്പിക്കുന്നത് മോണ്ടെവിഡിയ ഫ്ലോറിബുണ്ടയിൽ ക്വിനോൺ മെഥൈഡ് ട്രൈറ്റെർപീൻ (QT) ഉള്ളടക്കം വർദ്ധിപ്പിച്ചു. 400 ppm PBZ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം ലാവെൻഡർ ഓയിലിന്റെ ടെർപെനോയിഡ് പാതയുടെ ഘടനയിൽ മാറ്റം വരുത്തി. എന്നിരുന്നാലും, കൂണുകളിൽ PBZ പ്രയോഗിക്കുന്നതിനെക്കുറിച്ച് റിപ്പോർട്ടുകളൊന്നുമില്ല.
ട്രൈറ്റെർപീൻ ഉൽപാദനത്തിലെ വർദ്ധനവിൽ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്ന പഠനങ്ങൾക്ക് പുറമേ, ചില പഠനങ്ങൾ മോറിഫോമിസിലെ കെമിക്കൽ ഇൻഡ്യൂസറുകളുടെ സ്വാധീനത്തിൽ ട്രൈറ്റെർപീൻ ബയോസിന്തസിസിന്റെ നിയന്ത്രണ സംവിധാനങ്ങളെക്കുറിച്ചും വ്യക്തമാക്കിയിട്ടുണ്ട്. നിലവിൽ, MVA പാതയിലെ ട്രൈറ്റെർപീൻ ബയോസിന്തസിസുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ഘടനാപരമായ ജീനുകളുടെ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകളിലെ മാറ്റത്തിലാണ് പഠനങ്ങൾ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്നത്, ഇത് ടെർപെനോയിഡ് ഉൽപാദനത്തിൽ വർദ്ധനവിന് കാരണമാകുന്നു.12,14 എന്നിരുന്നാലും, ഈ അറിയപ്പെടുന്ന ഘടനാപരമായ ജീനുകൾക്ക് അടിസ്ഥാനമായ പാതകൾ, പ്രത്യേകിച്ച് അവയുടെ എക്സ്പ്രഷനെ നിയന്ത്രിക്കുന്ന ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകങ്ങൾ, മോറിഫോമിസിലെ ട്രൈറ്റെർപീൻ ബയോസിന്തസിസിന്റെ നിയന്ത്രണ സംവിധാനങ്ങളിൽ അവ്യക്തമായി തുടരുന്നു.
ഈ പഠനത്തിൽ, ഹണിസക്കിളിന്റെ (എസ്. ലോണിസെറിക്കോള) വെള്ളത്തിൽ മുങ്ങിയ ഫെർമെന്റേഷൻ സമയത്ത് ട്രൈറ്റെർപീൻ ഉൽപാദനത്തിലും മൈസീലിയൽ വളർച്ചയിലും സസ്യവളർച്ചാ റെഗുലേറ്ററുകളുടെ (പിജിആർ) വ്യത്യസ്ത സാന്ദ്രതകളുടെ സ്വാധീനം അന്വേഷിച്ചു. തുടർന്ന്, പിബിസെഡ് ചികിത്സയ്ക്കിടെ ട്രൈറ്റെർപീൻ ബയോസിന്തസിസിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന ട്രൈറ്റെർപീൻ ഘടനയും ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ പാറ്റേണുകളും വിശകലനം ചെയ്യാൻ മെറ്റബോളോമിക്സും ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റോമിക്സും ഉപയോഗിച്ചു. ആർഎൻഎ-സീക്വൻസിംഗും ബയോഇൻഫോർമാറ്റിക്സ് ഡാറ്റയും MYB (SlMYB) യുടെ ടാർഗെറ്റ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകത്തെ കൂടുതൽ തിരിച്ചറിഞ്ഞു. കൂടാതെ, ട്രൈറ്റെർപീൻ ബയോസിന്തസിസിൽ SlMYB ജീനിന്റെ റെഗുലേറ്ററി പ്രഭാവം സ്ഥിരീകരിക്കുന്നതിനും സാധ്യതയുള്ള ടാർഗെറ്റ് ജീനുകളെ തിരിച്ചറിയുന്നതിനും മ്യൂട്ടന്റുകൾ സൃഷ്ടിക്കപ്പെട്ടു. SlMYB ടാർഗെറ്റ് ജീനുകളുടെ പ്രൊമോട്ടറുകളുമായുള്ള SlMYB പ്രോട്ടീന്റെ പ്രതിപ്രവർത്തനം സ്ഥിരീകരിക്കാൻ ഇലക്ട്രോഫോറെറ്റിക് മൊബിലിറ്റി ഷിഫ്റ്റ് അസ്സേകൾ (EMSA) ഉപയോഗിച്ചു. ചുരുക്കത്തിൽ, PBZ ഉപയോഗിച്ച് ട്രൈറ്റെർപീൻ ബയോസിന്തസിസ് ഉത്തേജിപ്പിക്കുകയും PBZ ഇൻഡക്ഷന് പ്രതികരണമായി എസ്. ലോണിസെറിക്കോളയിലെ MVD, IDI, FDPS എന്നിവയുൾപ്പെടെയുള്ള ട്രൈറ്റെർപീൻ ബയോസിന്തറ്റിക് ജീനുകളെ നേരിട്ട് നിയന്ത്രിക്കുന്ന ഒരു MYB ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകം (SlMYB) തിരിച്ചറിയുകയും ചെയ്യുക എന്നതായിരുന്നു ഈ പഠനത്തിന്റെ ലക്ഷ്യം.
ഹണിസക്കിളിൽ IAA, PBZ എന്നിവയുടെ ഇൻഡക്ഷൻ ട്രൈറ്റെർപെനോയിഡ് ഉൽപാദനത്തെ ഗണ്യമായി വർദ്ധിപ്പിച്ചു, പക്ഷേ PBZ ന്റെ ഇൻഡക്ഷൻ പ്രഭാവം കൂടുതൽ പ്രകടമായിരുന്നു. അതിനാൽ, 100 mg/L എന്ന അധിക സാന്ദ്രതയിൽ PBZ ആണ് ഏറ്റവും മികച്ച ഇൻഡ്യൂസർ എന്ന് കണ്ടെത്തി, ഇത് കൂടുതൽ പഠനം അർഹിക്കുന്നു.