നെല്ലിന്റെ വേരുകളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത റൈസോസ്ഫിയർ സിംബയോട്ടിക് ഫംഗസ് *കൊസകോണിയ ഒറിസിഫില* NP19, *പൈറിക്കുലാരിയ ഒറിസേ* മൂലമുണ്ടാകുന്ന നെല്ല് പൊട്ടിത്തെറിക്കുന്നത് നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു വാഗ്ദാനമായ സസ്യവളർച്ചയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്ന ജൈവകീടനാശിനിയും ജൈവകീടനാശിനിയുമാണെന്ന് ഈ പഠനം തെളിയിക്കുന്നു. ഖാവോ ഡോക്ക് മാലി 105 (KDML105) ഇനത്തിലെ ജാസ്മിൻ നെൽ തൈകളുടെ പുതിയ ഇലകളിൽ ഇൻ വിട്രോ പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തി. *പൈറിക്കുലാരിയ ഒറിസേ* കൊണിഡിയയുടെ മുളയ്ക്കലിനെ NP19 ഫലപ്രദമായി തടഞ്ഞുവെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു. മൂന്ന് വ്യത്യസ്ത ചികിത്സാ സാഹചര്യങ്ങളിൽ *പൈറിക്കുലാരിയ ഒറിസേ* അണുബാധ തടഞ്ഞു: ആദ്യം, നെല്ലിൽ NP19 കോളനിവൽക്കരിക്കുകയും *പൈറിക്കുലാരിയ ഒറിസേ* കൊണിഡിയ കുത്തിവയ്ക്കുകയും ചെയ്തു; രണ്ടാമതായി, NP19, *പൈറിക്കുലാരിയ ഒറിസേ* കൊണിഡിയ എന്നിവയുടെ മിശ്രിതം ഇലകളിൽ പ്രയോഗിച്ചു;
റൈസോസ്ഫിയർ ബാക്ടീരിയ *കൊസകോണിയ ഒറിസിഫില* NP1914നെല്ലിന്റെ വേരുകളിൽ നിന്നാണ് ഇത് വേർതിരിച്ചെടുത്തത് (*Oryza sativa* L. cv. RD6). *Kosakonia oryziphila* NP19 ന് സസ്യവളർച്ചയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്ന ഗുണങ്ങളുണ്ട്, അതിൽ നൈട്രജൻ സ്ഥിരീകരണം, ഇൻഡോലിയാസെറ്റിക് ആസിഡ് (IAA) ഉത്പാദനം, ഫോസ്ഫേറ്റ് ലയിപ്പിക്കൽ എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു. രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, *Kosakonia oryziphila* NP19 ചിറ്റിനേസ് ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു.14.*കൊസകോണിയ ഒറിസിഫില* NP19 നെൽവിത്തുകളിൽ KDML105 നെൽവിത്തുകളിൽ പ്രയോഗിക്കുന്നത് നെല്ലിന്റെ ബ്ലാസ്റ്റ് അണുബാധയ്ക്ക് ശേഷം നെല്ലിന്റെ അതിജീവനം മെച്ചപ്പെടുത്തി. ഈ പഠനത്തിന്റെ ലക്ഷ്യം (i) നെല്ലിന്റെ ബ്ലാസ്റ്റിനെതിരെ *കൊസകോണിയ ഒറിസിഫില* NP19 ന്റെ ഇൻഹിബിറ്ററി സംവിധാനം വ്യക്തമാക്കുക, (ii) നെല്ലിന്റെ ബ്ലാസ്റ്റിംഗ് നിയന്ത്രിക്കുന്നതിൽ *കൊസകോണിയ ഒറിസിഫില* NP19 ന്റെ പ്രഭാവം അന്വേഷിക്കുക എന്നിവയാണ്.
സസ്യവളർച്ചയിലും വികാസത്തിലും പോഷകങ്ങൾ നിർണായക പങ്ക് വഹിക്കുന്നു, വിവിധ സൂക്ഷ്മജീവി രോഗങ്ങളെ നിയന്ത്രിക്കുന്ന ഘടകങ്ങളായി ഇത് പ്രവർത്തിക്കുന്നു. ഒരു സസ്യത്തിന്റെ ധാതു പോഷണം അതിന്റെ രോഗ പ്രതിരോധം, രൂപഘടന അല്ലെങ്കിൽ ടിഷ്യു സവിശേഷതകൾ, വൈറസസ്, അല്ലെങ്കിൽ രോഗകാരികൾക്കെതിരെ അതിജീവിക്കാനുള്ള കഴിവ് എന്നിവ നിർണ്ണയിക്കുന്നു. ഫിനോളിക് സംയുക്തങ്ങളുടെ സമന്വയം വർദ്ധിപ്പിച്ചുകൊണ്ട് ഫോസ്ഫറസിന് വികസനം മന്ദഗതിയിലാക്കാനും നെല്ലിലെ സ്ഫോടനത്തിന്റെ തീവ്രത കുറയ്ക്കാനും കഴിയും. പൊട്ടാസ്യം സാധാരണയായി നെല്ലിലെ സ്ഫോടനം, ബാക്ടീരിയൽ ഇലപ്പുള്ളി, ഇലപ്പോള പുള്ളി, തണ്ട് ചീയൽ, ഇലപ്പുള്ളി തുടങ്ങിയ നിരവധി നെല്ല് രോഗങ്ങളുടെ സാധ്യത കുറയ്ക്കുന്നു. ഉയർന്ന പൊട്ടാസ്യം വളങ്ങൾ നെല്ലിലെ ഫംഗസ് രോഗങ്ങളുടെ സാധ്യത കുറയ്ക്കുകയും വിളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുമെന്ന് പെറെനൗഡ് നടത്തിയ ഒരു പഠനം തെളിയിച്ചു. സൾഫർ വളങ്ങൾ ഫംഗസ് രോഗകാരികളോടുള്ള വിള പ്രതിരോധം മെച്ചപ്പെടുത്തുമെന്ന് നിരവധി പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്.27അധിക മഗ്നീഷ്യം (ക്ലോറോഫില്ലിന്റെ ഒരു ഘടകം) അരി പൊട്ടിപ്പോവാൻ കാരണമാകും.21സിങ്കിന് രോഗകാരികളെ നേരിട്ട് കൊല്ലാൻ കഴിയും, അതുവഴി രോഗത്തിന്റെ തീവ്രത കുറയ്ക്കും.22കൃഷിയിടത്തിലെ മണ്ണിൽ ഫോസ്ഫറസ്, പൊട്ടാസ്യം, സൾഫർ, സിങ്ക് എന്നിവയുടെ സാന്ദ്രത ചട്ടിയിൽ നടത്തിയ പരീക്ഷണത്തേക്കാൾ കൂടുതലാണെങ്കിലും, നെല്ലിന്റെ ഇലകളിലൂടെയാണ് ബ്ലാസ്റ്റ് പടരുന്നതെന്ന് ഫീൽഡ് പരീക്ഷണങ്ങൾ തെളിയിച്ചു. ആപേക്ഷിക ആർദ്രതയും താപനിലയും ശക്തമായ രോഗകാരി ആക്രമണത്തിന് പ്രതികൂലമായതിനാൽ, നെല്ലിന്റെ ബ്ലാസ്റ്റ് നിയന്ത്രിക്കുന്നതിൽ മണ്ണിലെ പോഷകങ്ങൾ വളരെ ഫലപ്രദമല്ലായിരിക്കാം.
ഫീൽഡ് പരീക്ഷണങ്ങളിൽ, സ്റ്റെനോട്രോഫോമോനാസ് മാൾട്ടോഫീലിയ, പി. ഡിസ്പെർസ, സാന്തോമോനാസ് സാചാരി, ബർക്കോൾഡെറിയ മൾട്ടിവോറൻസ്, ബർക്കോൾഡെറിയ ഡിഫ്യൂസ, ബർക്കോൾഡെറിയ വിയറ്റ്നാമിയൻസിസ്, സി. ഗ്ലിയം എന്നിവ എല്ലാ ചികിത്സകളിലും കണ്ടെത്തി. ഗോതമ്പ്, ഓട്സ്, വെള്ളരി, ചോളം, ഉരുളക്കിഴങ്ങ് എന്നിവയുടെ റൈസോസ്ഫിയറിൽ നിന്ന് സ്റ്റെനോട്രോഫോമോനാസ് മാൾട്ടോഫീലിയ വേർതിരിച്ചെടുക്കുകയും ജൈവ നിയന്ത്രണം കാണിക്കുകയും ചെയ്തു.പ്രവർത്തനംകൊളെറ്റോട്രിക്കം നിംഫിയേയ്ക്കെതിരെ.28 കൂടാതെ, പി. ഡിസ്പെർസ കറുത്തഅഴുകൽമധുരക്കിഴങ്ങ്.29 കൂടാതെ, സാന്തോമോണസ് സാക്കറിയുടെ R1 സ്ട്രെയിൻ, ബർഖോൾഡേറിയ മൂലമുണ്ടാകുന്ന നെല്ലിലെ സ്ഫോടനത്തിനും പാനിക്കിൾ റോട്ടിനും എതിരെ വിരുദ്ധ പ്രവർത്തനം കാണിച്ചിട്ടുണ്ട്.ഗ്ലൂമേ.30മുളയ്ക്കുന്ന സമയത്ത് നെല്ലിന്റെ കലകളുമായി ഒരു സഹവർത്തിത്വ ബന്ധം സ്ഥാപിക്കാൻ ബർഖോൾഡേറിയ ഒറിസ NP19 ന് കഴിയും, കൂടാതെ ചില നെല്ല് ഇനങ്ങൾക്ക് ഒരു പ്രാദേശിക സിംബയോട്ടിക് ഫംഗസായി മാറാനും കഴിയും. പറിച്ചുനടലിനുശേഷം മറ്റ് മണ്ണിലെ ബാക്ടീരിയകൾക്ക് നെല്ലിൽ കോളനിവൽക്കരിക്കാൻ കഴിയുമെങ്കിലും, ഒരിക്കൽ കോളനിവൽക്കരിക്കപ്പെട്ട ബ്ലാസ്റ്റ് ഫംഗസ് NP19, ഈ രോഗത്തിനെതിരെ നെല്ലിന്റെ പ്രതിരോധ സംവിധാനത്തിൽ ഒന്നിലധികം ഘടകങ്ങളെ സ്വാധീനിക്കുന്നു. NP19 പി. ഒറിസയുടെ വളർച്ചയെ 50%-ൽ കൂടുതൽ തടയുക മാത്രമല്ല (ഓൺലൈൻ അനുബന്ധത്തിലെ അനുബന്ധ പട്ടിക S1 കാണുക), മാത്രമല്ല ഇലകളിലെ ബ്ലാസ്റ്റ് നിഖേദങ്ങളുടെ എണ്ണം കുറയ്ക്കുകയും NP19 (RBf, RFf-B, RBFf-B) ഉപയോഗിച്ച് കുത്തിവച്ചതോ കോളനിവൽക്കരിക്കപ്പെട്ടതോ ആയ നെല്ലിന്റെ വിളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു (ചിത്രം S3).
സസ്യ സ്ഫോടനത്തിന് കാരണമാകുന്ന പൈറിക്കുലാരിയ ഒറിസേ എന്ന കുമിൾ, അണുബാധയ്ക്കിടെ ആതിഥേയ സസ്യത്തിൽ നിന്നുള്ള പോഷകങ്ങൾ ആവശ്യമുള്ള ഒരു ഹെമിട്രോഫിക് ഫംഗസാണ്. ഫംഗസ് അണുബാധയെ അടിച്ചമർത്താൻ സസ്യങ്ങൾ റിയാക്ടീവ് ഓക്സിജൻ സ്പീഷീസുകൾ (ROS) ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു; എന്നിരുന്നാലും, ആതിഥേയ-ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്ന ROS-നെ പ്രതിരോധിക്കാൻ പൈറിക്കുലാരിയ ഒറിസേ വിവിധ തന്ത്രങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു.31കോശഭിത്തി പ്രോട്ടീനുകളുടെ ക്രോസ്-ലിങ്കിംഗ്, സൈലം ഭിത്തികളുടെ കട്ടിയാക്കൽ, ROS ഉത്പാദനം, ഹൈഡ്രജൻ പെറോക്സൈഡിന്റെ നിർവീര്യമാക്കൽ എന്നിവയുൾപ്പെടെ രോഗകാരി പ്രതിരോധത്തിൽ പെറോക്സിഡേസുകൾ ഒരു പങ്കു വഹിക്കുന്നതായി കാണപ്പെടുന്നു.32ആന്റിഓക്സിഡന്റ് എൻസൈമുകൾ ഒരു പ്രത്യേക ROS സ്കാവെഞ്ചിംഗ് സിസ്റ്റമായി പ്രവർത്തിച്ചേക്കാം. അവയുടെ ആന്റിഓക്സിഡന്റ് ഗുണങ്ങൾ വഴി, സൂപ്പർഓക്സിഡന്റ് ഡിസ്മുട്ടേസും (SOD) പെറോക്സിഡേസും (POD) പ്രതിരോധ പ്രതികരണങ്ങൾ ആരംഭിക്കാൻ സഹായിക്കുന്നു, SOD പ്രതിരോധത്തിന്റെ ആദ്യ നിരയായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു.33*പൈറിക്കുലാരിയ ഒറിസേ*, *സാന്തോമോണസ് ഒറിസേ പിവി. ഒറിസേ* തുടങ്ങിയ സസ്യ രോഗകാരികളുമായുള്ള അണുബാധയ്ക്ക് ശേഷമാണ് നെല്ലിൽ സസ്യ പെറോക്സിഡേസ് പ്രവർത്തനം ഉണ്ടാകുന്നത്.32ഈ പഠനത്തിൽ, *മാഗ്നപോർത്ത് ഒറിസ* NP19 കുത്തിവച്ച നെല്ലിൽ പെറോക്സിഡേസ് പ്രവർത്തനം വർദ്ധിച്ചു; എന്നിരുന്നാലും, *മാഗ്നപോർത്ത് ഒറിസ* പെറോക്സിഡേസ് പ്രവർത്തനത്തെ ബാധിച്ചില്ല. H₂O₂ സിന്തേസ് എന്ന നിലയിൽ സൂപ്പർഓക്സൈഡ് ഡിസ്മുട്ടേസ് (SOD), O₂⁻ നെ H₂O₂ ആയി കുറയ്ക്കുന്നതിന് ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്നു. സസ്യത്തിനുള്ളിലെ H₂O₂ ന്റെ സാന്ദ്രത സന്തുലിതമാക്കുന്നതിലൂടെ വിവിധ സമ്മർദ്ദങ്ങളോടുള്ള സസ്യ പ്രതിരോധത്തിൽ SOD നിർണായക പങ്ക് വഹിക്കുന്നു, അതുവഴി വിവിധ സമ്മർദ്ദങ്ങളോടുള്ള സസ്യ സഹിഷ്ണുത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു. ഈ പഠനത്തിൽ, *മാഗ്നപോർത്ത് ഒറിസ* കുത്തിവയ്പ്പിന് 30 ദിവസങ്ങൾക്ക് ശേഷം (30 DAT) കല പരീക്ഷണത്തിൽ, RF, RBF ഗ്രൂപ്പുകളിലെ SOD പ്രവർത്തനങ്ങൾ R ഗ്രൂപ്പിലുള്ളതിനേക്കാൾ യഥാക്രമം 121.9% ഉം 104.5% ഉം കൂടുതലായിരുന്നു, ഇത് *മാഗ്നപോർത്ത് ഒറിസ* അണുബാധയ്ക്കുള്ള SOD പ്രതികരണത്തെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. പോട്ട്, ഫീൽഡ് പരീക്ഷണങ്ങളിൽ, *മാഗ്നപോർത്ത് ഒറിസേ* NP19-ഇൻകുലേറ്റഡ് നെല്ലിലെ SOD പ്രവർത്തനങ്ങൾ, കുത്തിവയ്പ്പ് നടത്തി 30 ദിവസങ്ങൾക്ക് ശേഷം കുത്തിവയ്പ്പ് നടത്താത്ത നെല്ലിലേതിനേക്കാൾ യഥാക്രമം 67.7% ഉം 28.8% ഉം കൂടുതലായിരുന്നു. പരിസ്ഥിതി, സമ്മർദ്ദ സ്രോതസ്സ്, സസ്യ തരം എന്നിവ സസ്യ ജൈവ രാസ പ്രതികരണങ്ങളെ ബാധിക്കുന്നു. സസ്യ ആന്റിഓക്സിഡന്റ് എൻസൈം പ്രവർത്തനങ്ങളെ പാരിസ്ഥിതിക ഘടകങ്ങൾ നേരിട്ട് ബാധിക്കുന്നു, ഇത് സസ്യ സൂക്ഷ്മജീവി സമൂഹത്തെ മാറ്റുന്നതിലൂടെ സസ്യ ആന്റിഓക്സിഡന്റ് എൻസൈം പ്രവർത്തനങ്ങളെ ബാധിക്കുന്നു.
ഈ പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിച്ചിരിക്കുന്ന നെല്ല് വർഗ്ഗത്തിൽപ്പെട്ട ബ്ലാസ്റ്റ് ഡിസീസ് ഫംഗസ് (കൊസകോണിയ ഒറിസിഫില NP19, NCBI ആക്സഷൻ നമ്പർ PP861312) സ്ട്രെയിൻ ആയിരുന്നു.13തായ്ലൻഡിലെ നഖോൺ ഫാനോം പ്രവിശ്യയിലെ (16° 59′ 42.9″ N 104° 22′ 17.9″ E) നെല്ല് ഇനമായ RD6 ന്റെ വേരുകളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്തത്. ഈ സ്ട്രെയിൻ 30°C ലും 150 rpm ലും 18 മണിക്കൂർ ന്യൂട്രിയന്റ് ബ്രൂത്തിൽ (NB) വളർത്തി. ബാക്ടീരിയൽ സാന്ദ്രത കണക്കാക്കാൻ, 600 nm-ൽ ബാക്ടീരിയൽ സസ്പെൻഷന്റെ ആഗിരണം അളന്നു. ബാക്ടീരിയൽ സസ്പെൻഷന്റെ സാന്ദ്രത10⁶അണുവിമുക്തമായ ഡീയോണൈസ്ഡ് വെള്ളത്തോടൊപ്പം CFU/mL (ഡിഎച്ച്₂ഒ). റൈസ് ബ്ലാസ്റ്റ് ഫംഗസ് (പൈറിക്കുലാരിയ ഒറൈസേ) ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ഡെക്സ്ട്രോസ് അഗർ (പിഡിഎ) യിൽ സ്പോട്ട്-ഇനാക്ലിഡ് ചെയ്ത് 25°C താപനിലയിൽ 7 ദിവസത്തേക്ക് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു. ഫംഗസ് മൈസീലിയം റൈസ് ബ്രാൻ അഗർ മീഡിയത്തിലേക്ക് (2% (w/v) റൈസ് തവിട്, 0.5% (w/v) സുക്രോസ്, 2% (w/v) അഗർ ഡീയോണൈസ്ഡ് വെള്ളത്തിൽ ലയിപ്പിച്ചത്, pH 7) മാറ്റി 25°C താപനിലയിൽ 7 ദിവസത്തേക്ക് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു. കോണിഡിയ ഉണ്ടാക്കുന്നതിനായി ഒരു സാധ്യതയുള്ള നെൽകൃഷിയുടെ (KDML105) ഒരു അണുവിമുക്തമാക്കിയ ഇല മൈസീലിയത്തിൽ വയ്ക്കുകയും 25°C താപനിലയിൽ 5 ദിവസത്തേക്ക് അൾട്രാവയലറ്റ്, വെളുത്ത വെളിച്ചത്തിൽ സംയോജിതമായി ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. മൈസീലിയവും ബാധിച്ച ഇലയുടെ ഉപരിതലവും 10 മില്ലി അണുവിമുക്തമാക്കിയ 0.025% (v/v) ട്വീൻ 20 ലായനി ഉപയോഗിച്ച് സൌമ്യമായി തുടച്ചാണ് കോണിഡിയ ശേഖരിച്ചത്. മൈസീലിയം, അഗർ, അരി ഇലകൾ എന്നിവ നീക്കം ചെയ്യുന്നതിനായി എട്ട് പാളികളുള്ള ചീസ്ക്ലോത്തിലൂടെ ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത ഫിൽട്ടർ ചെയ്തു. കൂടുതൽ വിശകലനത്തിനായി സസ്പെൻഷനിലെ കൊണിഡിയ സാന്ദ്രത 5 × 10⁵ കൊണിഡിയ/മില്ലി ആയി ക്രമീകരിച്ചു.
കൊസകോണിയ ഒറിസിഫില NP19 കോശങ്ങളുടെ പുതിയ കൾച്ചറുകൾ NB മീഡിയത്തിൽ 37 °C താപനിലയിൽ 24 മണിക്കൂർ കൾച്ചർ ചെയ്തുകൊണ്ടാണ് തയ്യാറാക്കിയത്. സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷന് ശേഷം (3047 × g, 10 മിനിറ്റ്), സെൽ പെല്ലറ്റ് ശേഖരിച്ച്, 10 mM ഫോസ്ഫേറ്റ്-ബഫേർഡ് സലൈൻ (PBS, pH 7.2) ഉപയോഗിച്ച് രണ്ടുതവണ കഴുകി, അതേ ബഫറിൽ വീണ്ടും സസ്പെൻഡ് ചെയ്തു. സെൽ സസ്പെൻഷന്റെ ഒപ്റ്റിക്കൽ സാന്ദ്രത 600 nm ൽ അളന്നു, ഏകദേശം 1.0 മൂല്യം ലഭിച്ചു (പോഷക അഗർ പ്ലേറ്റുകളിൽ പ്ലേറ്റ് ചെയ്തുകൊണ്ട് നിർണ്ണയിക്കുന്ന 1.0 × 10⁷ CFU/μl ന് തുല്യം). P. ഒറിസയുടെ കോണിഡിയ PBS ലായനിയിൽ സസ്പെൻഡ് ചെയ്ത് ഒരു ഹീമോസൈറ്റോമീറ്റർ ഉപയോഗിച്ച് എണ്ണുന്നതിലൂടെ ലഭിച്ചു. *K. ഒറിസിഫില* NP19, *P എന്നിവയുടെ സസ്പെൻഷനുകൾ. ഇല സ്മിയർ പരീക്ഷണങ്ങൾക്കായി, യഥാക്രമം 1.0 × 10⁷ CFU/μL, 5.0 × 10² കോണിഡിയ/μL എന്നിവയുടെ സാന്ദ്രതയിൽ പുതിയ നെല്ലിന്റെ ഇലകളിലാണ് കെ. ഓറിസിഫില* കോണിഡിയ തയ്യാറാക്കിയത്. അരി സാമ്പിൾ തയ്യാറാക്കൽ രീതി ഇപ്രകാരമായിരുന്നു: നെൽ തൈകളിൽ നിന്നുള്ള 5 സെന്റീമീറ്റർ നീളമുള്ള ഇലകൾ മുറിച്ച് നനഞ്ഞ ആഗിരണം ചെയ്യുന്ന പേപ്പർ കൊണ്ട് നിരത്തിയ പെട്രി പാത്രങ്ങളിൽ വച്ചു. അഞ്ച് ചികിത്സാ ഗ്രൂപ്പുകൾ സ്ഥാപിച്ചു: (i) R: ബാക്ടീരിയ കുത്തിവയ്പ്പ് ഇല്ലാത്ത അരി ഇലകൾ ഒരു നിയന്ത്രണമായി, 0.025% (v/v) ട്വീൻ 20 ലായനി ഉപയോഗിച്ച് സപ്ലിമെന്റ് ചെയ്തു; (ii) RB + F: K. ഓറിസിഫില NP19 ഉപയോഗിച്ച് സപ്ലിമെന്റ് ചെയ്ത അരി, അരി സ്ഫോടനത്തിന് കാരണമാകുന്ന ഫംഗസിന്റെ 2 μL കോണിഡിയ സസ്പെൻഷൻ ഉപയോഗിച്ച് സപ്ലിമെന്റ് ചെയ്തു; (iii) R + BF: ഗ്രൂപ്പ് R ലെ അരിക്ക് 4 μl ബ്ലാസ്റ്റ് ഫംഗൽ കോണിഡിയ സസ്പെൻഷനും K. ഓറിസിഫില NP19 (വോളിയം അനുപാതം 1:1) മിശ്രിതവും ചേർത്തു; (iv) R + F: ഗ്രൂപ്പ് R-ലെ അരിക്ക് 2 μl ബ്ലാസ്റ്റ് ഫംഗൽ കൊണിഡിയ സസ്പെൻഷൻ ചേർത്തു; (v) RF + B: ഗ്രൂപ്പ് R-ലെ അരിക്ക് 2 μl ബ്ലാസ്റ്റ് ഫംഗൽ കൊണിഡിയ സസ്പെൻഷൻ ചേർത്തു; 30 മണിക്കൂർ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു, തുടർന്ന് 2 μl K. ഓറിസിഫില NP19 അതേ സ്ഥലത്ത് ചേർത്തു. എല്ലാ പെട്രി ഡിഷുകളും 25°C താപനിലയിൽ ഇരുട്ടിൽ 30 മണിക്കൂർ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു, തുടർന്ന് തുടർച്ചയായ വെളിച്ചത്തിൽ വച്ചു. ഓരോ ഗ്രൂപ്പും ട്രിപ്പിളായി രൂപപ്പെടുത്തി. 72 മണിക്കൂർ കൾച്ചറിനുശേഷം, സ്കാനിംഗ് ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പി (SEM) വഴി സസ്യകലകൾ നിരീക്ഷിക്കുകയും വിശകലനം ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. ചുരുക്കത്തിൽ, സസ്യകലകൾ 2.5% (v/v) ഗ്ലൂട്ടറാൾഡിഹൈഡ് അടങ്ങിയ ഫോസ്ഫേറ്റ് ബഫറിൽ ഉറപ്പിക്കുകയും ഒരു പരമ്പര എത്തനോൾ ലായനികളിലൂടെ നിർജ്ജലീകരണം ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. കാർബൺ ഡൈ ഓക്സൈഡ് ഉപയോഗിച്ച് ക്രിട്ടിക്കൽ-പോയിന്റ് ഉണക്കിയ ശേഷം, സാമ്പിളുകൾ സ്വർണ്ണം കൊണ്ട് സ്പട്ടർ-പൂശി ഒടുവിൽ ഒരു സ്കാനിംഗ് ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പ് ഉപയോഗിച്ച് പരിശോധിക്കുകയും ചെയ്തു.15
പോസ്റ്റ് സമയം: ഡിസംബർ-15-2025